Search academic texts

Information × Registration Number 0409U003833, Candidate dissertation Status к.б.н. Date 14-10-2009 popup.evolution o Title Metabolic engineering of the initial stages of xylose catabolism in the yeast Hansenula polymorpha aimed at constructing improved producers of ethanol Author Dmytruk Olena Valeriivna, popup.head Sibirny Andrij Andrijovych popup.opponent Федоренко Віктор Олександрович popup.opponent Колісник Ганна Василівна Description Об'єкт дослідження: перші етапи метаболізму ксилози у термотолерантних дріжджів H. polymorpha. Мета роботи: отримання штамів термотолерантних дріжджів H. polymorpha з підвищеним рівнем алкогольної ферментації ксилози, шляхом модифікацій перших етапів метаболізму цієї пентози, її відновлення до ксиліту та окиснення до ксилулози. Методи дослідження: мікробіологічні, молекулярно-біологічні, генетичні, біохімічні, статистичні. Вперше було здійснено успішну надекспресію генів xylA, що кодують ксилозоізомеразу E. coli і S. сoelicolor у дріжджів, забезпечуючи формування функціонально активного ферменту. Сконструйовано рекомбінантний штам H. polymorpha з одночасною надекспресією генів xylA E. coli і XYL3 H. polymorpha, що характеризувався підвищеним у 3,5-4 рази рівнем алкогольної ферментації ксилози, порівняно зі штамом дикого типу. За допомогою сайт-специфічного мутагенезу було створено модифіковану форму ксилозоредуктази, спорідненість якої до NADPН(H+) зменшилась у 17 разів, порівняно з нативною формою фермента. Одержано рекомбінантний штам H. polymorpha з посиленою експресією модифікованої форми ксилозоредуктази та надекспресією нативних ксилітолдегідрогенази і ксилулокінази, який характеризувався підвищеним у 7,4 раза рівнем алкогольної ферментації ксилози та зниженою у 5 разів кількістю нагромадженого ксиліту, порівняно з диким штамом. Сфера використання: прикладна мікробіологія, біотехнологія, біохімія. Registration Date 2009-10-14 popup.nrat_date 2020-04-04 Close