Search academic texts

Information × Registration Number 0411U003809, Candidate dissertation Status к.б.н. Date 07-06-2011 popup.evolution o Title Development of the test kits prototypes for DNA diagnostics of some inherited diseases (cystic fibrosis, spinal muscular atrophy, phenylketonuria) Author Soloviov Oleksandr Oleksandrovych, popup.head Livshyts Liudmyla Avramivna popup.opponent Дубей Ігор Ярославович popup.opponent Корховий Віталій Іванович Description Об'єкт - мутації в генах PAH, CFTR, SMN1, які спричинюють спадкові захворювання моногенної природи: фенілкетонурію, муковісцидоз, спінальну м'язову атрофію. Мета - розробка прототипів тест-систем для молекулярно-генетичної діагностики найбільш розповсюджених спадкових захворювань моногенної природи - муковісцидозу, фенілкетонурії, спінальної м'язової атрофії з використанням сучасних генних біотехнологій. Методи - виділення та очищення ДНК, олігонуклеотидний синтез, полімеразна ланцюгова реакція, рестрикційний аналіз, секвенування, різні види гель-електрофорезу, ПЛР в реальному часі, біоінформатичне моделювання та статистична обробка даних. Результати та новизна - Вперше було розроблено та апробовано методичні підходи для детекції найбільш розповсюджених мутацій гена CFTR (муковісцидоз), використовуючи принципи алель-специфічної ПЛР та зондів типу TaqMan. Перевагою цих прототипів тест-систем у порівнянні з існуючими на ринку є їх висока ефективність у використанні при низькій вартості. Вперше створено методику кількісного ДНК-аналізу делеції 7-го екзону гена SMN1 (спінальна м'язова атрофія) та доведено її ефективність для виявлення гетерозиготного носійства даної мутації. Вперше розроблено платформу для скринінгу мутантних варіантів кодуючої послідовності гена PAH (фенілкетонурія) з використанням градієнтного гель-електрофорезу в денатуруючих умовах та доведено ефективність використання нового барвника Barva NA для візуалізації поліакриламідних гелів. Вперше створено банк референсних зразків ДНК з мутаціями в генах CFTR, SMN1 та PAH, які є невід'ємними складовими тест-систем для ДНК діагностики муковісцидозу, спінальної м'язової атрофії та фенілкетонурії. Галузь - біотехнологія. Registration Date 2011-06-07 popup.nrat_date 2020-04-04 Close