Search academic texts

Information × Registration Number 0413U004103, Candidate dissertation Status к.б.н. Date 05-06-2013 popup.evolution o Title Mechanisms of DNA track formation in single cell gel electrophoresis (comet assay) Author Zazhytska Marianna Olegivna, popup.head Sivolob Andriy Volodymyrovych popup.opponent Говорун Дмитро Миколайович popup.opponent Білан Павло Володимирович Description Об'єкт: просторова орагнізація ДНК в ядрах клітин. Мета: встановити фізичні механізми формування треку ДНК (хвоста комети) під час кометного електрофорезу ізольованих клітин та з'ясувати фактори, що впливають на електрофоретичну рухливість ДНК. Методи: виділення лімфоцитів із цільної крові, лізис клітин в агарозних блоках, нейтральний та лужний варіанти електрофорезу ізольованих клітин, світлова та флуоресцентна мікроскопія, спектрофотометричні методи, статистичні та теоретичні методи хімічної кінетики. Результати: встановлено кінетику формування треку ДНК при електрофорезі ізольованих клітин, а також зовнішні фактори, що на неї впливають, запропоновано підхід до оцінки рівня надспіралізації петельних доменів, встановлено факт оборотності утворення зони хвоста комети, запропоновано підхід до диференціації різних рівнів пошкодженності ДНК з використанням інтеркаляторів, запропоновано модель взаємодії ДНК з білками ядерного матриксу. Новизна: вперше проведено реєстрацію кінетики формування хвоста комети для інтактних та опромінених лімфоцитів в умовах нейтрального та лужного варіантів електрофорезу; вперше встановлено, що вихід ДНК з нуклеоїдів є оборотним; підтверджено модель топологічної взаємодії білків ядерного матриксу з ДНК, а також показано, що така взаємодія є необхідною умовою формування зони хвоста комети при електрофорезі. Сфера використання: біофізика, біохімія, молекулярна біологія, генетика. Результати дисертації впроваджені в навчальний процес ННЦ "Інститут біології" Київського національного університету імені Тараса Шевченка. Registration Date 2013-06-05 popup.nrat_date 2020-04-04 Close