Search academic texts

Information × Registration Number 0417U006142, Candidate dissertation Status Кандидат ветеринарних наук Date 20-12-2017 popup.evolution o Title Scientific and experimental confirmation of dotimmunoassay technology for brucellosis and leucosis of Author Khomenko Yaroslav Vasylovych, popup.head Skybitskyi Volodymyr Huriiovych popup.opponent Pryskoka Viktor Andriiovych popup.opponent Radzykhovskyi Mykola Leonidovych Description Розроблено методологію отримання компонентів для діагностики шляхом постановки дот-імуноаналізу за бруцельозу та лейкозу великої рогатої худоби: удосконалено методику отримання ліпополісахариду антигену B. аbortus; обґрунтовано доцільність використання рекомбінантного антигену вірусу лейкозу великої рогатої худоби, що містить протеїни з молекулярними масами 24 та 51 kDa та визначено оптимальні їх концентрації в дот-імуноаналізі; оптимізовано методику (Hermanson G. T., 1996) кон’югації рекомбінантного білка G Streptococcus spр. із колоїдним золотом; розроблено технологію отримання кон’югату рекомбінантного білка G Streptococcus spp. із колоїдним вугіллям; обґрунтовано доцільність використання листового білого полістиролу (HIPS) і розроблено оригінальну методику крапельної сорбції на ньому бруцельозного та лейкозного антигенів. Оптимізовано умови постановки дот-імуноаналізу, зокрема визначено, що використання з метою розбавляння досліджуваних сироваток крові фосфатно-сольового буфера (рН 7,2–7,4), який містить 0,75 % желатини, 2,5 М сечовини і 0,01 % бензойної кислоти повністю усуває можливість неспецифічної взаємодії компонентів дот-імуноаналізу. Розроблено експрес-методику диференціювання Br. аbortus та Yersinia Enterocolitica на базі дот-імуноаналізу. Доведено, що специфічність, чутливість та відтворюваність результатів дот-імуноаналізу за використання розроблених компонентів та оптимізованих умов постановки дот-імуноаналізу в процесі діагностики бруцельозу та лейкозу великої рогатої худоби відповідають вимогам Міжнародного епізоотичного бюро: специфічність і чутливість становлять 100 %, відтворюваність – задовольняє сучасні вимоги щодо тест-систем даного типу (CV<10 %). Registration Date 2017-12-20 popup.nrat_date 2020-04-03 Close