Search academic texts

Information × Registration Number 0421U100842, Candidate dissertation Status Кандидат біологічних наук Date 06-04-2021 popup.evolution o Title Obtaining of genetically modified plants of Solanaceae family with the human lactoferrin gene to enhance their resistance to phytopathogens Author Buziashvili Anastasiia Yu., popup.head Yemets Alla popup.opponent Kolomiiets Yuliia V. popup.opponent Tsygankova Viktoriia Description В дисертаційній роботі показано перспективність застосування генетичної трансформації рослин томатів та картоплі геном лактоферина людини (hLf) для під-вищення їх стійкості до бактеріальних (Ralstonia solanacearum, Clavibacter michi-ganensis) та грибних (Phytophthora infestans, Fusarium sambucinum – у випадку кар-топлі) фітопатогенів. Трансформацію томатів сортів Money Maker та Лагідний, кар-топлі сортів Вернісаж, Світанок Київський, Левада та Зарево проводили Agrobacterium-опосередкованим методом за використання штаму A. tumefaciens EHA105, який ніс плазмідний вектор pBin35Lf, що містив ген hLf під контролем 35 S промотора віруса мозаїки цвітної капусти (CaMV35S), а також ген nptII, що забезпе-чує стійкість до канаміцина. Селекцію трансгенних ліній томатів та картоплі прово-дили на живильному середовищі в присутності 100 мг/л канаміцина. Інтеграцію гена hLf підтверджували за допомогою ПЛР-аналізу із використанням праймерів, специ-фічних до даного гена. Експресію лактоферина людини в трансгенних лініях підтверджували за допомогою Вестерн блот аналізу із використанням специфічних моноклональних антитіл проти лактоферину. За допомогою біотесту «дифузії в агар» було показано, що зразки трансгенних рослин, які експресували лактоферин, інгібують ріст бактерій та грибів. В результаті біотестів, які проводили шляхом за-раження трансгенних рослин томатів та картоплі конідіями P. infestans, картоплі – F. sambucinum, було встановлено підвищення стійкості трансгенних ліній до фітофторозу з 1 до 7 балів, до фузаріозу – з 2 до 7 балів за 9-бальною шкалою. Ре-зультати даної роботи вказують на перспективність трансформації цінних сортів то-матів та картоплі геном лактоферину людини для підвищення їх стійкості до фітопа-тогенів бактеріальної та грибної природи. Registration Date 2021-04-09 popup.nrat_date 2021-04-09 Close