Search academic texts

Information × Registration Number 0425U000296, Candidate dissertation Status Кандидат біологічних наук Date 02-10-2025 popup.evolution . Title Protein-protein interactions of the PH domain and structural and functional features of the C2 domain of the BCR protein in Ph’-positive leukemias. Author Igor Kravchuk, popup.head Gennadiy Telegeev popup.opponent Myhaylo Zavelevich popup.opponent Olexandr Minchenko Description Дисертаційна робота присвячена встановленню структурно-функціональних особливостей С2 домену BCR, вивченню взаємодії РН домену BCR з білками FNBP1, SMC1A, HSPB1 та розробці системи CRISPR-Cas9, направленої проти хромосомної перебудови t(9;22)(q34;q11). В рамках дослідження С2 домену BCR було проведено біоінформатичне передбачення його вторинної та третинної структури, створено генетичну конструкцію для бактеріальної експресії, успішно отримано його у вигляді рекомбінантного білка. Для цього рекомбінантного С2 домену було валідовано структуру методом кругового дихроїзму, а також було виявлено його специфічне зв’язування з вісьмома фосфоліпідами. Для встановлення взаємодії між FNBP1 та РН доменом білка BCR проводили із застосуванням широкого спектру методів. Зокрема було вперше виявлено взаємодію між PH доменом білка BCR та повнорозмірним завдяки їх коімунопреципітації після спільної експресії в еукаріотичних клітинах, а також методом пулдаун в умовах in vitro. Методом far-вестерн-блот аналізу підтвердили взаємодію саме з N-кінцевим фрагментом FNBP1. Вперше також була виявлена колокалізація білка BCR та FNBP1 в клітинах макрофагів J774 під час фагоцитозу. За допомогою конфокальної мікроскопії було виявлено колокалізацію білка структурної підтримки хромосом SMC1A та BCR. В процесі виконання цієї роботи було створено генетичну конструкцію для бактеріальної експресії білка HSPB1. Отриманий за допомогою цієї конструкції рекомбінантний білок може бути використаний для досліджень його взаємодії з РН доменом білка BCR. Під час виконання роботи було створено генетичні конструкції, що кодують в собі компоненти CRISPR-Cas9 системи націленої на хромосомну перебудову t(9;22)(q34;q11) в клітинах К562. Registration Date 2025-09-24 popup.nrat_date 2025-09-24 Close