Search academic texts

Information × Registration Number 0516U000064, Doctoral dissertation Status д.б.н. Date 15-01-2016 popup.evolution o Title Biotechnology and bioanalytical standardization enzyme immunoassay diagnostic tests Author Galkin Alexander Yurevich, popup.head Shyrobokov Vladimir Pavlovich popup.opponent Луговськой Едуард Віталійович popup.opponent Карпов Олександр Вікторович popup.opponent Лиманська Ольга Юріївна popup.opponent Руденко Ада Вікторівна Description У дисертаційній роботі представлені результати наукового обґрунтування біотехнології створення високоінформативних засобів імуноферментної діагностики та параметрів біоаналітичної стандартизації і валідації діагностичних препаратів. Одержано оригінальні набори моноклональних антитіл до IgА, IgG та IgE людини, пероксидази хрону (HRP), основного білку зовнішньої мембрани Ch. trachomatis, та доведено можливість їх застосування для розробки різних модифікацій високоінформативного ІФА та/або імуноафінної хроматографії. Розроблено удосконалені методики отримання високоочищених препаратів IgЕ людини, Fc-фрагментів IgG та IgA, методику специфічного виділення IgE із використанням імуноафінних сорбентів. Обґрунтовано оптимальні параметри біотехнології отримання рекомбінантного білку теплового шоку (rHSP-60) Ch. trachomatis. Доведено стимулюючу дію екстрактів клівії кіноварної і зефірантесу великоквіткового на біосинтез rHSP-60 бактеріями E. coli. Доведено можливість використання отриманих імуносорбенетів, імуноферментних кон'югатів, rHSP-60 Ch. trachomatis для розробки високоінформативних ІФА-наборів. Обґрунтовано доцільність застосування аналіт-опосередкованої фермент-активуючої системи ампліфікації сигналу у ІФА для визначення надмалих концентрацій біоаналітів. Визначено оптимальні умови синтезу кон'югатів "білок-білок" та "білок-гаптен" для різних модифікацій високочутливого ІФА. Показано, що у сироватках крові інфікованих Ch. trachomatis осіб місяться антиідіотипові антитіла із анти-HSP-60 активністю, що є однією із причин хибнонегативних результатів. Доведено високу активність гібридних позитивних контролів для ІФА-наборів, що побудовані за принципом IgM-"пастки", а також призначені для виявлення IgM та IgA антитіл до Ch. trachomatis у непрямому ІФА. Обґрунтовано параметри стандартизації та валідаційні характеристики засобів серодіагностики, сформовано науково-методичні рекомендації щодо валідації різних типів ІФА. Registration Date 2016-01-15 popup.nrat_date 2020-04-03 Close