Registration Number
0825U001400, PhD dissertation
Status
Доктор філософії
Date
11-06-2025
popup.evolution
.
Title
Acquirement of drug resistance of pathogenic fungi under the influence of fungicidal pesticides
Author
Anastasiia A. Hrynzovska,
popup.head Vitalii V. Bobyr
popup.opponent Dmytro O. Stepanskyi
popup.opponent Dmytro L. Kyryk
popup.review Mykola V. Khaitovich
popup.review Tetiana I. Zinchenko
popup.rada
Bogomolets National Medical University
Description
Дисертація присвячена вирішенню актуальної наукової задачі – з’ясуванню можливості набуття лікарської стійкості патогенних грибів внаслідок використання фунгіцидних пестицидів в агропромисловості.
Аналіз наукової літератури свідчить, що широке застосування хімічних пестицидів і добрив у сільському господарстві має негативні екологічні наслідки, зокрема, впливає на здоров'я людей, та сприяє зростанню захворюваності. Особливу загрозу становить використання фунгіцидів, хімічно подібних до протигрибкових препаратів для лікування людей, у боротьбі з фітопатогенними грибами. Серед таких мікроорганізмів слід виділити Aspergillus fumigatus, який не є фітопатогеном, але є частиною ґрунтової мікрофлори, співіснує з іншими грибами, які піддаються обробці пестицидами. Використання сільськогосподарських фунгіцидів призводить до того, що мікроскопічні гриби, включаючи A. fumigatus, потрапляючи під селективний тиск, можуть стати джерелом поширення резистентних штамів. Постійне використання таких фунгіцидів зменшує кількість чутливих штамів, що дозволяє резистентним формам поширюватися і ставати домінуючими. Це викликає занепокоєння, оскільки поширення стійких штамів грибів є серйозною загрозою для здоров’я людей.
Мета – встановлення зв’язку між використанням сільськогосподарських фунгіцидів та розвитком резистентності до медичних антимікотиків у клінічних штамів грибів, на основі мікробіологічного обгрунтування ососбливостей формування перехресної резистентності до препаратів похідних імідазолів та триазолів.
Дослідження проводили на базі Інституту гігієни та екології та в науководослідній бактеріологічній лабораторії кафедри мікробіології та паразитології з основами імунології Навчально-наукового інституту профілактичної медицини та громадського здоров’я Національного медичного університету імені О.О. Богомольця (Київ, Україна). Дослідження проводилося не лише на території України, а і у рамках співпраці з провідною лабораторією Іспанії («Мікологічна референс-лабораторія, Національний центр мікробіології, Інститут Здоров´я Карлоса III, Махадаонда, Мадрид, Іспанія» (Mycology Reference laboratory,
National Centre for Microbiology, Instituto de Salud Carlos III, Majadahonda, Madrid, Spain), з якою було забезпечено обмін методиками, сучасними підходами до аналізу та інтерпретації отриманих результатів, що суттєво підвищило якість та достовірність проведеного експерименту.
Під час визначення біологічної активності фунгіцидів немедичного призначення були використані клінічні штами Candida albicans, Candida krusei, Candida glabrata, виділені від хворих на кандидоз, які отримували лікування в медичних установах м. Києва та м. Вінниці (Україна), з використанням референс штамів Candida albicans DSM 1386
(https://www.dsmz.de/collection/catalogue/details/culture/DSM-1386) музею культур університету Лейпцигу, Candida krusei RN 7106, Candida glabrata YI99, які зберігаються в музеї культур мікроорганізмів кафедри мікробіології та паразитології з основами імунології Національного медичного університету ім. О. О. Богомольця (м. Київ, Україна). В роботі також використані клінічні штами A. fumigatus від лікарні Universitario 12 de Octubre (Мадрид, Іспанія) та штами A. fumigatus із навколишнього середовища (Мадрид, Іспанія) за однаковий період (з лютого 2022 року по лютий 2024 року), відбувався відбір зразків та ідентифікація ізолятів з подальшою екстракцією ДНК A. fumigatus, генотипування та характеристика молекулярних механізмів стійкості до азолів.
Усі клінічні штами A. fumigatus та деякі від навколишнього середовища були генотиповані відповідно до методу типування TRESPERG. Було проаналізовано послідовності гена cyp51A стійких до азолів ізолятів A. fumigatus. Молекулярні механізми резистентності до азолів вивчені шляхом ампліфікації та секвенування повної послідовності гена cyp51A, включаючи його промотор для штамів, які були стійкі принаймні до одного азолу. Ген cyp51A, включаючи його промотор, ампліфікували та секвенували.
Registration Date
2025-04-29
popup.nrat_date
2025-04-29 / 2026-07-01
