Registration Number
0826U004480, PhD dissertation
Status
Доктор філософії
Date
30-09-2026
popup.evolution
o
Title
Integrative analysis of the architecture of the collagenous stroma and molecular-biological markers of its remodeling in breast cancer.
Author
Oleksandr M. Mushii,
popup.head Vasyl F. Chekhun
popup.opponent Galyna V. Ostrovska
popup.opponent Ganna V. Gerashchenko
popup.review Serhii V. Hohol
popup.review Myhaylo P. Zavelevich
popup.rada
R.E. Kavetsky Institute of Experimental Pathology, Oncology and Radiobiology National Academy of Sciences of Ukraine
Description
Дисертаційну роботу присвячено ідентифікації особливостей просторової організації та кількісних характеристик колагенової матриці, асоційованих з агресивністю перебігу РМЗ. Об’єктом дослідження був рак молочної залози, а предметом — колагеновий каркас тканини РМЗ, його кількісні параметри та їхні взаємозв’язки з експресією MMP1, MMP8, TIMP3 і LOX та мікроРНК, залучених до регуляції ремоделювання колагенової строми. Уперше розроблено та апробовано алгоритм верифікації параметрів дезорганізації колагенового матриксу у тканині РМЗ, який поєднує гістохімічне забарвлення, цифрову сегментацію волокон і подальший морфометричний аналіз. Апробацію алгоритму проведено на 120 зразках тканини РМЗ та 30 зразках тканини фіброаденом. Загалом проаналізовано близько 1,4 млн колагенових волокон, що дозволило кількісно охарактеризувати архітектоніку стромального компонента доброякісних і злоякісних новоутворень молочної залози та мінімізувати суб’єктивність морфологічної оцінки. Встановлено, що тканина РМЗ має специфічний морфометричний профіль організації колагенового матриксу. Порівняно з тканиною доброякісних новоутворень молочної залози вона характеризувалася зменшенням довжини (p<0,001) і ширини (p<0,001) колагенових волокон на тлі підвищення їхньої прямолінійності (p<0,001) та зміни просторової орієнтації (p<0,05). Отримані дані свідчать, що малігнізація супроводжується не лише кількісною перебудовою строми, а й формуванням відмінного топологічного профілю волокнистого матриксу.
Доведено зв’язок морфометричних характеристик колагенової строми зі ступенем поширеності пухлинного процесу. Збільшення розміру РМЗ асоціювалося зі зменшенням довжини (p=0,0006) і ширини (p<0,0001) колагенових волокон та підвищенням їхньої щільності (p=0,0027). Наявність метастазів у регіонарних лімфатичних вузлах супроводжувалася зменшенням довжини і ширини волокон, збільшенням їхньої прямолінійності та щільності, а також підвищенням показника TSR (для всіх зазначених змін p<0,0001). Найтісніші кореляційні зв’язки з клінічними характеристиками РМЗ встановлено для ширини колагенових волокон: із категорією T коефіцієнт кореляції становив r=–0,751, а з категорією N — r=–0,711. Щільність волокон прямо корелювала з категорією N (r=0,790).
На основі отриманих результатів побудовано багатофакторні регресійні моделі. Встановлено, що ширина, довжина та щільність колагенових волокон є незалежними предикторами розміру пухлинного вогнища; коефіцієнт детермінації відповідної моделі становив R²=0,679. Ширина і щільність волокон разом із показником TSR були незалежними предикторами метастатичного ураження регіонарних лімфатичних вузлів; модель пояснювала 77,2% варіабельності досліджуваної ознаки (R²=0,772). Це підтверджує можливість кількісного використання архітектоніки колагенової строми для комплексного оцінювання агресивності РМЗ. Ідентифіковано профіль експресії білків ремоделювання стромального мікрооточення та встановлено його зв’язок із просторовою організацією колагенової матриці. Експресія MMP1 прямо корелювала з прямолінійністю колагенових волокон (r=0,273), тоді як експресія MMP8 була обернено пов’язана з їхньою шириною, довжиною та прямолінійністю (r від –0,267 до –0,303). Рівень TIMP3 обернено корелював із шириною, прямолінійністю та щільністю волокон і прямо — з кутом їхньої орієнтації (r від –0,462 до 0,443). Для LOX встановлено пряму кореляцію з кутом орієнтації колагенових волокон (r=0,301).
Показано, що низькодиференційований РМЗ характеризувався підвищенням експресії MMP1 на 59,2%, MMP8 — на 96,6% та LOX — у 2,05 раза (p<0,05). Збільшення розміру пухлини та наявність метастатичного ураження регіонарних лімфатичних вузлів супроводжувалося підвищенням рівня LOX відповідно на 74,2 і 57,8%, тоді як у пухлинах категорії T2 експресія TIMP3 знижувалася на 65,6% (p<0,05). Отже, поєднане визначення MMP1, MMP8, TIMP3 і LOX із морфометричними параметрами колагенових волокон цілістно відображає структурні та молекулярні прояви ремоделювання пухлинної строми при прогресуванні РМЗ.
Уперше встановлено асоціацію експресії мікроРНК, залучених до регуляції генів ремоделювання позаклітинного матриксу, з клініко-патологічними характеристиками РМЗ. Підвищена експресія miR-26b-5p була пов’язана з відсутністю метастатичного ураження регіонарних лімфатичних вузлів (N0) та люмінальним B молекулярним підтипом (p<0,05). Високий рівень miR-100-5p асоціювався з меншим розміром первинної пухлини та початковою стадією пухлинного процесу (p<0,05), а підвищена експресія miR-142-3p — з HER2/neu -позитивним молекулярним підтипом (p<0,05). Ці результати розширюють уявлення про регуляторні механізми ремоделювання пухлинного мікрооточення та обґрунтовують подальше дослідження зазначених мікроРНК як потенційних маркерів перебігу РМЗ..
Registration Date
2026-08-11
popup.nrat_date
2026-08-11 / 2026-10-20
