Registration Number
0421U101996, Candidate dissertation
Status
Кандидат біологічних наук
Date
27-04-2021
popup.evolution
.
Title
Development of genetically engineered conjugates and their use for detection and purification of the therapeutically important proteins
Author
Usenko Mariia Oleksandrivna,
popup.head Kordium Vitalii Arnoldovych
popup.opponent Garmanchuk Liudmyla Vasylivna
popup.opponent Chernyshenko Volodymyr Oleksandrovych
popup.review Garmanchuk Liudmyla Vasylivna
popup.review Deriabina Olena Grygorivna
popup.rada
Institute of Molecular Biology and Genetics of NAS of Ukraine
Description
Дисертаційна робота присвячена розробці методів отримання біфункціональних кон’югатів на основі цільових білків та маркерних молекул в E.coli. Було отримано штами-продуценти білків rhIL7-His, rhIL7-CBD та rhIL7-BAPmut. Оптимізовано методи отримання протеїнів у розчинній функціонально-активній формі ренатурацією in vitro. Злитий білок rhIL7-CBD, після іммобілізації на мікрокристалічній целюлозі СС31, та rhIL7-His, після іммобілізації на металоафінному сорбенті, було застосовано для отримання поліклональних антитіл, специфічних до інтерлнейкіну 7 людини з чистотою понад 95 %. Із застосуванням rhIL7-BAPmut проведено скринінг комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів. Отримано штами-продуценти E. coli злитого білка scFv(IFNβ1b)–ВAPmut та рекомбінантного аналога протеїнкінази ASK1 людини. Показано можливість застосування імунокон’югату scFv(IFNβ1b)–ВAPmut для виявлення інтерферону бета-1b людини. Визначено умови біосинтезу протеїнкінази ASK1, які забезпечили отримання у препаративній кількості ферменту з функціональною активністю, співставною з комерційно доступними аналогами. Проаналізовано варіабельність індивідуальних реакцій мононуклеарних клітин периферичної крові людини на rhIL7 як важливого прогностичного показника стану імунної системи для подальших імунологічних досліджень.
Registration Date
2021-05-24
popup.nrat_date
2021-05-24 / 2026-06-30
