Реєстраційний номер
0421U101996, Кандидатська дисертація
На здобуття
Кандидат біологічних наук
Дата захисту
27-04-2021
Статус
Захищена
Назва роботи
Створення генно-інженерних кон’югатів і їх використання для виявлення та очищення важливих у терапевтичному значенні білків
Здобувач
Усенко Марія Олександрівна,
Керівник Кордюм Віталій Арнольдович
Опонент Гарманчук Людмила Василівна
Опонент Чернишенко Володимир Олександрович
Рецензент Гарманчук Людмила Василівна
Рецензент Дерябіна Олена Григорівна
Установа, організація, у вченій раді якої відбудеться/відбувся захист
Інститут молекулярної біології і генетики Національної академії наук України
Опис
Дисертаційна робота присвячена розробці методів отримання біфункціональних кон’югатів на основі цільових білків та маркерних молекул в E.coli. Було отримано штами-продуценти білків rhIL7-His, rhIL7-CBD та rhIL7-BAPmut. Оптимізовано методи отримання протеїнів у розчинній функціонально-активній формі ренатурацією in vitro. Злитий білок rhIL7-CBD, після іммобілізації на мікрокристалічній целюлозі СС31, та rhIL7-His, після іммобілізації на металоафінному сорбенті, було застосовано для отримання поліклональних антитіл, специфічних до інтерлнейкіну 7 людини з чистотою понад 95 %. Із застосуванням rhIL7-BAPmut проведено скринінг комбінаторної бібліотеки кДНК варіабельних генів імуноглобулінів. Отримано штами-продуценти E. coli злитого білка scFv(IFNβ1b)–ВAPmut та рекомбінантного аналога протеїнкінази ASK1 людини. Показано можливість застосування імунокон’югату scFv(IFNβ1b)–ВAPmut для виявлення інтерферону бета-1b людини. Визначено умови біосинтезу протеїнкінази ASK1, які забезпечили отримання у препаративній кількості ферменту з функціональною активністю, співставною з комерційно доступними аналогами. Проаналізовано варіабельність індивідуальних реакцій мононуклеарних клітин периферичної крові людини на rhIL7 як важливого прогностичного показника стану імунної системи для подальших імунологічних досліджень.
Дата реєстрації
2021-05-24
Додано/оновлено в НРАТ
2021-05-24 / 2026-06-30
