Registration Number
0825U002500, PhD dissertation
Status
Доктор філософії
Date
14-08-2025
popup.evolution
.
Title
Investigation of the Structure and Functions of the αC-Regions and BβN-Domains of Fibrin(ogen) Using Molecular Effectors
Author
Yevhenii Kucheriavyi,
popup.head Volodymyr Chernyshenko
popup.opponent Tetiana Halenova
popup.opponent Oleksandr Korneliuk
popup.review Olena Yusova
popup.review Yevhen M. Makohonenko
popup.rada
Palladin Institute of Biochemistry of the National Academy of Sciences of Ukraine
Description
Полімеризація фібрину та агрегація тромбоцитів є ключовими етапами формування фібриново-тромбоцитарного згустку, необхідного для гемостазу, але небезпечного при патологічному тромбогенезі. Метою дослідження було з'ясування ролі αС-регіонів та BβN-доменів фібрин(оген)у в цих процесах за допомогою молекулярних ефекторів різного типу: протеїназ, пептидів та моноклональних антитіл.
Застосовувались протеїнази з отрут Echis multisquamatis, Agkistrodon halys halys і Bacillus thuringiensis, які селективно гідролізували αС-регіони або BβN-домени, генеруючи форми фібриногену з частковими втратами функціональних доменів (desBβ1-42, desAα414-610, desAα505-610). Використання пептидів Bβ1-42, Aα414-610, Aα505-610 дозволило вивчити функціональну значущість відповідних фрагментів. Антитіла 2d2a, I-5A та I-5B блокували ключові епітопи в BβN- та αС-регіонах.
Турбідиметрія, електронна мікроскопія та агрегатометрія показали, що BβN-домен є критичним для ініціації полімеризації фібрину через центр «С», однак ця функція реалізується лише у комплексі з αС-регіонами. Протеолітичне видалення αС-регіонів подовжувало lag-період фібриноутворення, а їх блокада - порушувала латеральну асоціацію протофібрил. Це свідчить про фазову специфіку участі αС-регіонів: у комплексі з BβN-доменами вони стабілізують протофібрили, а також забезпечують міжмолекулярні αС:αС взаємодії на етапі зростання фібринового каркасу.
Дослідження агрегації тромбоцитів виявило, що αС-регіони, на відміну від BβN-доменів, модулюють щільність клітинних контактів, впливаючи на ступінь, але не на швидкість агрегації. Таким чином, отримані результати дозволяють запропонувати нову модель ролі αС-регіонів та BβN-доменів у формуванні фібриново-тромбоцитарного тромбу, що має значення для розробки стратегій селективної модуляції тромбогенезу.
Registration Date
2025-06-25
popup.nrat_date
2025-06-25 / 2026-07-01
