Реєстраційний номер
0825U002500, Дисертація доктора філософії
На здобуття
Доктор філософії
Дата захисту
14-08-2025
Статус
Захищена
Назва роботи
Дослідження структури та функцій αС-регіонів та ВβN-доменів фібрин(оген)у за допомогою молекулярних ефекторів
Здобувач
Кучерявий Євгеній Петрович,
Керівник Чернишенко Володимир Олександрович
Опонент Галенова Тетяна Іванівна
Опонент Корнелюк Олександр Іванович
Рецензент Юсова Олена Іванівна
Рецензент Макогоненко Євген Митрофанович
Установа, організація, у вченій раді якої відбудеться/відбувся захист
Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна Національної академії наук України
Опис
Полімеризація фібрину та агрегація тромбоцитів є ключовими етапами формування фібриново-тромбоцитарного згустку, необхідного для гемостазу, але небезпечного при патологічному тромбогенезі. Метою дослідження було з'ясування ролі αС-регіонів та BβN-доменів фібрин(оген)у в цих процесах за допомогою молекулярних ефекторів різного типу: протеїназ, пептидів та моноклональних антитіл.
Застосовувались протеїнази з отрут Echis multisquamatis, Agkistrodon halys halys і Bacillus thuringiensis, які селективно гідролізували αС-регіони або BβN-домени, генеруючи форми фібриногену з частковими втратами функціональних доменів (desBβ1-42, desAα414-610, desAα505-610). Використання пептидів Bβ1-42, Aα414-610, Aα505-610 дозволило вивчити функціональну значущість відповідних фрагментів. Антитіла 2d2a, I-5A та I-5B блокували ключові епітопи в BβN- та αС-регіонах.
Турбідиметрія, електронна мікроскопія та агрегатометрія показали, що BβN-домен є критичним для ініціації полімеризації фібрину через центр «С», однак ця функція реалізується лише у комплексі з αС-регіонами. Протеолітичне видалення αС-регіонів подовжувало lag-період фібриноутворення, а їх блокада - порушувала латеральну асоціацію протофібрил. Це свідчить про фазову специфіку участі αС-регіонів: у комплексі з BβN-доменами вони стабілізують протофібрили, а також забезпечують міжмолекулярні αС:αС взаємодії на етапі зростання фібринового каркасу.
Дослідження агрегації тромбоцитів виявило, що αС-регіони, на відміну від BβN-доменів, модулюють щільність клітинних контактів, впливаючи на ступінь, але не на швидкість агрегації. Таким чином, отримані результати дозволяють запропонувати нову модель ролі αС-регіонів та BβN-доменів у формуванні фібриново-тромбоцитарного тромбу, що має значення для розробки стратегій селективної модуляції тромбогенезу.
Дата реєстрації
2025-06-25
Додано/оновлено в НРАТ
2025-06-25 / 2026-07-01
