Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0213U003130, 0110U000153 , Науково-дослідна робота Назва роботи Дослідження сигнальних механізмів індукції апоптозу злоякісних клітин при голодуванні за аргініном та розробка методів комбінованої протипухлинної ензимотерапії на моделях in vitro Назва етапу роботи Керівник роботи Стасик О.В., Кандидат біологічних наук Дата реєстрації 24-01-2013 Організація виконавець Iнститут біології клітини НАН України Опис етапу Розроблено методичні підходи до культивування злоякісних клітин у формі тривимірних культур сфероїдів, проведено порівняльний аналіз впливу голодування за індивідуальними амінокислотами (аргініном, лейцином, лізином та метіоніном) на ріст та життєздатність злоякісних клітин за умов їх культивування в дво- та тривимірній культурах, а також виконано ряд досліджень, спрямованих на встановлення ролі регуляції клітинного циклу та mTOR-опосередкованого сигнального шляху у відповіді пухлинних клітин на голодування за аргініном. Вперше встановлено, що за умов культивування у формі тривимірних сфероїдів злоякісні клітини є більш резистентними до дії дефіциту аргініну, а також лейцину, лізину й метіоніну, у порівнянні з двовимірними моношаровими культурами цих клітин. Клітини пухлин, позитивні за р53 та з конститутивною активацією PI3K-mTOR-Akt/PKB антиапоптичного шляху, є резистентними до голодування за аргініном та іншими незамінними амінокислотами у моношаровій культурі, і навпаки. Показано, що нездатність пухлинних клітин зупинятися у G1 фазі клітинного циклу за умов голодування за аргініном може бути однією з причин їх чутливості до дефіциту цієї амінокислоти. У більшості випадків ця властивість корелює з пошкодженням білка р53. Встановлено, що голодування за аргініном призводить до значних змін морфології клітин і специфічного зниження рухливості злоякісних клітин, незалежно від рівня їх чутливості до дефіциту аргініну. Причиною цього феномену можуть бути зміни в організації цитоскелету. Показано, що застосування аналога аргініну рослинного походження канаваніну в середовищі без аргініну чи в поєднанні з рекомбінантною аргіназою призводить до селективного зниження життєздатності та проліферативного потенціалу епітелійних пухлинних клітин людини різного органного походження, і незначно впливає на виживання псевдонормальних клітин. Токсична протипухлинна дія канаваніну залежить від синтезу білка de novo. Встановлено, що суспензійні клітини лейкемій людини є особливо чутливими до комбінованої терапії на основі голодування за аргініном та канаваніном і гинуть шляхом апоптозу за умов in vitro. Також показано, що інкубація в середовищі без аргініну з канаваніном призводить не тільки до зупинки росту сфероїдів пухлинних клітин, як у випадку лише голодування за аргініном, але й до їх часткової дезінтеграції. Як і в моношаровій культурі, канаванін селективно підсилює каспазозалежний апоптоз, індукований голодуванням за аргініном, у пухлинних клітинах у тривимірній сфероїдній культурі. Опис продукції Розроблено методичні підходи до культивування злоякісних клітин у формі тривимірних культур сфероїдів, проведено порівняльний аналіз впливу голодування за індивідуальними амінокислотами (аргініном, лейцином, лізином та метіоніном) на ріст та життєздатність злоякісних клітин за умов їх культивування в дво- та тривимірній культурах, а також на їх адгезивні властивості, міграцію та інвазивність. Показано, що застосування аналога аргініну рослинного походження канаваніну в середовищі без аргініну чи в поєднанні з рекомбінантною аргіназою призводить до селективного зниження життєздатності та проліферативного потенціалу епітелійних пухлинних клітин людини різного органного походження. Встановлено, що суспензійні клітини лейкемій людини є особливо чутливими до комбінованої терапії на основі голодування за аргініном та канаваніном і гинуть шляхом апоптозу за умов in vitro. Автори роботи Ігуменцева Н.І. Барська М.Л. Бобак Я.П. Винницька-Мироновська Б.О. Вовк О.І. Воробець З.Д., Гриджук О.С. Данилейченко В.В. Денега І.О. Красовська О.С. Курліщук Ю.В. Линів Л.С. Маєвська О.М. Пєрєвєрзєва Г.Г. Ржепецький Ю.А. Сибірна Н.О. Стасик О.Г. Чень О.І. Чернишук С.В. Шуваєва Г.Ю. Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити