Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0213U004399, 0113U002866 , Науково-дослідна робота Назва роботи Нові нанорозмірні елементи біосенсорів на основі оксидоредуктаз. Назва етапу роботи Керівник роботи Гончар Михайло Васильович, Кандидат педагогічних наук Дата реєстрації 12-12-2013 Організація виконавець Iнститут біології клітини НАН України Опис етапу Звіт про НДР: 31 с., 11 рис., 1 табл., 38 джерел. Об'єкт дослідження - оксидоредуктази аналітичного призначення: глюкозооксидаза (ГО) грибів роду Penicillium, метиламінооксидаза (АМО) рекомбінантних дріжджів Saccharomyces сerevisiae, наночастинки золота (Au-НЧ) і срібла (Ag-НЧ). Мета роботи - конструювання нових нанорозмірних елементів безмедіаторних біосенсорів третього покоління на глюкозу та метиламін, створення основ технології отримання нових біорозпізнаючих сенсорних об'єктів за використання ГО та АМО, ко-іммобілізованих із пероксидазою на поверхні фунціоналізованих НЧ. Мета І етапу - дослідження по одержанню та характеристиці препарату АМО з рекомбінантних дріжджів S. cerevisiae, а також дослідження з синтезу і структурної характеристики НЧ та методів їх функціоналізації. Методи дослідження - мікробіологічні, біохімічні, фізико-хімічні, ензиматичні, генетичні, генно-інженерні. В результаті виконання 1-го етапу НДР: сконструйовано експресійний плазмідний вектор, що несе ген AМО Hansenula polymorpha та tag-фрагмент, гістидиновий кластер (His)6, під контролем індуцибельного промотора гена CUP1 дріжджів; розроблено ефективний метод виділення і очищення рекомбінантної АМО з клітин трансформантів S. cerevisiae за допомогою афінної хроматографії на Ni-NTA-агарозі; синтезовано Ag-НЧ шляхом відновлення нітрату арґентуму глюкозою та Au-НЧ - відновленням гідрогентетрахлороаурумату тринатрій цитратом або натрій бор гідридом; методами скануючої i трансмісійної електронної мікроскопії, атомно-силової мікроскопії та рентгено-структурного аналізу доведено нанорозмірність НЧ, а також синтезованих Au-нанотрубок ; активовано НЧ двома способами - за допомогою 16-меркаптогексадеканової кислоти та цистеаміну. Роботу виконано відповідно до плану у повному обсязі. За результатами роботи подано до друку 1 статтю та опубліковано тези. МЕТИЛАМІНООКСИДАЗА, НАНОЧАСТИНКИ БЛАГОРОДНИХ МЕТАЛІВ, МЕТОДИ ФУНКЦІОНАЛІЗАЦІЇ НАНОЧАСТИНОК. Опис продукції Сконструйовано експресійний плазмідний вектор, що несе ген метиламінооксидази (АМО) Hansenula polymorpha та гістидиновий кластер (His)6 під контролем індуцибельного промотора гена CUP1 дріжджів; розроблено ефективний метод виділення і очищення рекомбінантної АМО з клітин трансформантів S. cerevisiae за допомогою афінної хроматографії на Ni-NTA-агарозі; синтезовано та функціоналізовано наночастинки срібла (Ag-НЧ) та золота ( Au-НЧ); методами електронної та атомно-силової мікроскопії, а також рентгено-структурного аналізу доведено нанорозмірність синтезованих і функціоналізованих НЧ та Au-нанотрубок. Роботу виконано відповідно до плану у повному обсязі. За результатами виконання 1-го етапу НДР подано до друку 1 статтю та опубліковано тези. Автори роботи Гайда Галина Зуфарівна Закальська Оксана Мирославівна Закальський Андрій Євстахович Стасюк Наталія Євгенiвна Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити