Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0217U000773, 0112U003243 , Науково-дослідна робота Назва роботи Дріжджова клітина як модель для дослідження сигнальних механізмів, задіяних у розвитку патологічних процесів в організмі людини Назва етапу роботи Керівник роботи Сибірна Наталія Олександрівна, Стасик Олена Георгіївна, Дата реєстрації 28-02-2017 Організація виконавець Львівський національний університет імені Івана Франка Опис етапу У результаті проведеної роботи було сконструювано вектор для експресії химерного генетичного конструкту yEGFP3-SNCA, який кодує альфа-синуклеїн людини, злитий із зеленим флуоресцентним білком (EGFP), та отримано модельні штами дріжджів H. polymorpha. Наявність гетерологічного білка альфа-синуклеїну, кон'югованого з EGFP, у клітинах модельних штамів детектували методом флуоресцентної мікроскопії та Вестерн блот-аналізу. Для моделювання старіючих нейронів за хвороби Паркінсона, яким притаманний гіпометаболізм глюкози, було сконструйовано штами, що продукують альфа-синуклеїн людини та характеризуються пошкодженим транспортом глюкози. Було встановлено, що продукування та накопичення альфа-синуклеїну людини у клітинах метилотрофних дріжджів H. polymorpha призводить до пошкодження росту та негативно впливає на життєздатність клітин. Дефіцит глюкози як джерела Карбону мав негативний вплив на клітини модельних штамів, а також підсилював цитотоксичність альфа-синуклеїну, тоді як надлишок глюкози в культуральному середовищі підвищував резистентність модельних штамів до продукції гетерологічного альфа-синуклеїну. У модельні штами також було введено маркер ауксотрофності за аргініном (делеція гена НрASS1, який кодує фермент аргініносукцинатсинтетазу), що дало можливість створити для клітин дріжджів умови, близькі до тих, що виникають внаслідок лімітування людського організму за цією напівзамінною амінокислотою. Шляхом створення ліміту екзогенного аргініну для ass1 мутанта дріжджів, ми зможемо індукувати та регулювати процес автофагії у клітинах дріжджів і досліджувати процеси деградації альфа-синуклеїнових агрегатів. Опис продукції Створено новий модельний організм на основі дріжджів Hansenula polymorpha, в яких продукується альфа-синуклеїн людини, для пошуку ефективних підходів до терапії хвороби Паркінсона шляхом індукції селективної або загальної автофагійної деградації цього білка за умов дефіциту незамінних або напівзамінних для людини амінокислот на тлі впливу різних ендо- та езогенних чинників (іони металів, надлишок або дефіцит внутрішньоклітинної глюкози та ін.). Автори роботи Денега Ірина Ігорівна Климишин Наталія Ігорівна Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити