Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0220U001083, 0117U000458 , Науково-дослідна робота Назва роботи Дослідження мімікруючих пептидів бактерій, визначення їх молекулярно-біологічних характеристик та захисних властивостей при вірусних інфекціях Назва етапу роботи Керівник роботи Рибалко Світлана Леонтіїна, Дата реєстрації 22-01-2020 Організація виконавець ДУ "Інститут епідеміології та інфекційних хвороб ім. Л.В. Громашевського НАМН України" Опис етапу Об'єкт дослідження: мімікруючі пептиди, молекулярна-біологічна характеристика пептидів, біологічна активність, антивірусна активність пептидів, епідермальний фактор росту, моделі гострої та персистентної інфекції (HSV, HCV, HBV, EBV, CMV, HPV).В результаті проведенних досліджень виділені мімікруючі пептиди з культурального середовища нових продуцентів. Мімікруючі пептиди бактерій та культур клітин охарактеризовані по антигенній спорідненості з мімікруючими пептидами інших продуцентів і пептидами вірусів, та властивості інгібувати репродукцію ДНК- та РНК-вірусів.Хроматографічний профіль пептидів мімікринів включає 3 домінуючі піки з молекулярною масою 50,0 - 55 кДа; 44 кДа; 22 кДа. При пошуку в базі NCBI серед білків всіх організмів з мас-спектрами хроматографічних піків 11 і 19 з молекулярною масою 43,9 - 44,0 кДа виявлені гомологічні пептиди: Fc фрагменти важкого ланцюга IgG, білком зв'язування з рецептором вірусу гепатиту В та фрагменти важкого ланцюга анти-HIV, ? ланцюгів IgG, кристалічною структурою нейтралізуючого фрагменту антитіла зв'язуючого з гемаглютиніном Н3 вірусу грипу, пептид 1-207 складений методом sequence coverage з гомологічних послідовностей Mi B.subtilis, який відповідає моноклональному антитілу Трастозумаб, зв'язаного з позаклітинним доменом рецептора 2 епідермального фактору росту. Експериментально підтверджена гомологія Mi B.subtilis з позаклітинним доменом HER-2 + герцептин (Трастозумаб) методом імуноферментного аналізу.Встановлено високий індекс селективності по відношенню до вірусу грипу та сурогатного вірусу гепатиту С та трансфекованого вірусу HCV людини. Методом електрофорезу, ПЛР з специфічними праймерами до генів вірусу грипу A-PR-8, виявлені мішені взаємодії віруса грипа з мімікринами. Показано, що Мі Bacillus subtilis повністю блокують гени РВ1, РВ2, М1+М2 та інгібують ген гемагглютиніну. Mi Corynebacterium інгібують також вище означені гени вірусу грипу A-PR-8.Встановлено, що препарат мімікрин захищає мишей від летальної грипозної інфекції при профілактичній та лікувальній схемах введення на рівні стандартного препарату Таміфлю. При використанні препаратів мімікринів (Bacillus subtilis, HeLa1, HeLa2) був виявлений значний проапоптичний ефект на клітинах Jurkat.Нові бактеріальні ад'юванти - мімікрини впливають на синтез антитіл не тільки до вакцин, що містять живий атенуйований вірус або його субодиниці, але й для вакцин, що містять рекомбінантні білки. Мімікрин стафілококу має подібності в експресії генів ІФНу з екзогенним ІФНом зі збільшення кількісної експресії генів ПКР та РНКази L. Мімікрини ефективно інгібують синтез вірусної ДНК в модельній системі реплікації. З 5 немодифікованих пептидів, які повністю співпадали за амінокислотною послідовністю з Mi B.subtilis, були відібрані та синтезовані пептиди NH2-NVAAPSVESFPPSDEQLK-COOH та NH2- DIQMTQSPSSLSASVGDR-COOH в Германії (Metabion prim), які були позначені Р18, Р19. Створені 3Д моделі пептидів Р18, Р19. В результаті проведених досліджень було показано, що синтезовані пептиди Р18, Р19 мають високу ступінь спорідненості з мімікруючими пептидами із бактерій та виявили феномен взаємодії сироваток до рецептору епідермального фактору росту, мімікруючими пептидами бактерій, клітин та синтезованому пептиду Р18 з антигенами в діагностичних системах визначення антитіл до HSV, Rubella, HIV, HCV, ЦМВ, Тр. Вперше ідентифікований новий рецептор для вірус інфікованих клітин, який взаємодіє з сироватками до пептидів вірусів та перехресно з сироватками до рецептору EgFR взаємодіє з пептидами вірусів, а також впливає на репродукцію вірусів грипу і герпесу. В результаті проведених досліджень отримані моделі гострої та персистентної інфекції, продукуючі персистентні інфекції вірусів гепатиту С, гепатиту В, вірусу папіломи, вірусу Епштейн - Барру, цитомегаловірусу отримували шляхом трансфекції кДНК та ДНК вірусів, виділених з плазми крові та цервікальних соскобів хворих на ці інфекції.Було показано, що при персистентних вірусних інфекціях HSV, HCV, HPV, EBV, CMV визначається високий рівень експресії мімікруючих пептидів та рецепторів епідермального фактору росту, що може бути використане, як маркер переходу гострої інфекції в персистентну. Опис продукції 1.Фармацевтична композиція для місцевого лікування та профілактики інфекційних захворювань верхніх дихальних шляхів. 2. Спосіб моделювання герпетичного ураження головного мозку у мишей вірусом простого герпесу I типу.3.Спосіб оцінки гістопатологіч-них змін печінки при герпесвірусній інфекції. 4.Спосіб нейтралізації побічної дії інтерферону альфа при його застосуванні в клінічній практиці Автори роботи Григор'єва Світлана Михайлівна Дядюн Світлана Терентіївна Калітенко Тамара Іванівна Пальчіковська Лариса Ігнатієвна Порва Юлія Іванівна Старосила Дарья Борисівна Трохимчук Тетяна Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити