Пошук академічних текстів

Реєстраційний номер

0225U004153, (0120U102238) , Науково-дослідна робота

Назва роботи

Структурні і функціональні дослідження факторів елонгації трансляції вищих евкаріотів

Назва етапу роботи

Вивчення просторової будови субодиниць eEF1Bα, eEF1Bβ i eEF1Bγ комплексу факторів трансляції eEF1B із використанням воднево-дейтерієвого обміну із подальшою мас-спектрометрією та інших фізико-хімічних методів.

Керівник роботи

Негруцький Борис Сергійович, Доктор біологічних наук

Дата реєстрації

20-11-2025

Організація виконавець

Інститут молекулярної біології і генетики Національної академії наук України

Опис роботи

Метою роботи є аналіз просторової організації і функціонування групи 1 факторів елонгації трансляції ссавців (eEF1A та мультибілковий комплекс eEF1B). Для досягнення цієї мети планується виконати наступні завдання. По-перше, отримати експериментальні дані, що дозволять побудувати атомарні моделі просторової організації субодиниць трансляційного комплексу eEF1B та архітектури комплексу в цілому. По-друге, провести експериментальні дослідження та побудувати на їх основі модель просторової організації ізоформи 1 фактора елонгації 1А. По третє, визначити потенційне функціональне значення метилування лізинових залишків в молекулі фактора елонгації 1А (eEF1A), зокрема, експериментально перевірити гіпотезу стосовно того, що метилування деяких залишків лізину в eEF1A може впливати на взаємодію цього білка з партнерами, такими як субодиниці комплексу eEF1B, що може розкрити молекулярний механізм нещодавно відкритого впливу метилування eEF1A на онкогенну трансформацію клітин. По четверте, описати молекулярні механізми дії нових інгібіторів eEF1A із потенційним протипухлинним ефектом.

Опис етапу

Об`єкти дослідження –комплекс факторів трансляції людини eEF1B, фактор елонгації трансляції eEF1A, ізоформи eEF1A1 і eEF1A2, фактори елонгації трансляції eEF1Bα, eEF1Bβ, eEF1Bγ. Мета роботи - розкриття просторової організації трансляційних комплексів та їх компонентів, дослідження потенційної ролі посттрансляційних модифікацій у функціонуванні факторів трансляції. Методи дослідження – воднево-дейтерієвий обмін із подальшою мас-спектрометрією, аналітичне ультрацентрифугування, мутагенез білків, хроматографічне виділення індивідуальних білків, аналітична гель-фільтрація, система біолюмінесцентного резонансного енергетичного переносу, Вестерн блот, ко-імунопреципітація, ко-преципітація білків, конфокальна мікроскопія, мас-спектрометрія, полімеразна ланцюгова реакція, молекулярно-біологічні методи роботи з ДНК, кінетичні методи, біоінформатичний аналіз, молекулярне моделювання, молекулярний докінг. Проведено виміри гідродинамічного радіусу eEF1Bα за допомогою методу динамічного світлорозсіяння із використанням адаптивної кореляції. Значення дорівнює 3.35 нм. За цим критерієм здійснено відбір оптимальної моделі тривимірної структури цього білка. Із використанням методу розсіяння рентгенівських променів оцінено молекулярну форму eEF1Bβ, що було важливо для відбору оптимальної моделі тривимірної структури цього білка. Аналітичним ультрацентрифугуванням показано, що еEF1Bγ, в залежності від концентрації, дуже легко формує гомоасоціати різного рівня мультимірності. Мономер еEF1Bγ є помірно видовженим неглобулярним білком в розчині.

Опис продукції

Автори роботи

Новосильна Олександра Валеріївна
Єльська Ганна Валентінівна
Порубльова Лариса Василівна
Шалак Вячеслав Федорович
Лисецький Ігор Леонидович
Лук`яненко Ганна Іванівна

Додано в НРАТ

2025-11-20