Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0208U002282, 0103U000075 , Науково-дослідна робота Назва роботи Вивчення на модельних об'єктах очікуваних терапевтичних ефектів від введення рекомбінантних молекул Назва етапу роботи Керівник роботи Кордюм Віталій Арнольдович, Дата реєстрації 24-01-2008 Організація виконавець Інститут молекулярної біології і генетики Опис етапу Звіт про НДР: 2с. 184 посилання, 101 рисунків, 14 таблиць. Об'єкт дослідження - рекомбінантні молекули. Мета роботи - вивчення на модельних об'єктах очікуваних терапевтичних ефектів від введення рекомбінантних молекул. Методи дослідження - техніка рекомбінантних молекул, імуноферментний аналіз, клітинні технології, гістологічний аналіз. Робота проводилась по чотирьох напрямах. За першим напрямом було розроблено технологію генетичної корекції цукрового діабету 1-го типу та атеросклерозу шляхом введення рекомбінантних молекул з цільовими генами, тобто генної терапії. Сконструйовано ряд молекулярних векторних конструкцій з повнорозмірними генами препроінсуліну та аполіпопротеїну А1 людини та розроблено ефективну невірусну систему переносу генів in vitro та in vivo. Для стандартизації одержання препаратів векторних ДНК створено прилади, що дозволили забезпечити відтворюваність показників ефективності трансфекції. На моделі СТЦ-індукованого діабету у мишей встановлена залежність терапевтичної дії від дози препарату рекомбінантної ДНК і визначена її оптимальна кількість, що призводить до повної компенсації діабету у тварин. Розроблені моделі СТЦ-індукованого інсулінзалежного діабету у свиней породі Ландрас та у міні свинок породи "В'єтнамська карликова". На цих моделях були визначені довготривалі терапевтичні ефекти (повернення патологічного стану тварин до норми) від введення рекомбінантних ДНК з геном інсуліну людини. Результати регресії діабету у модельних тварин після одноразової генної терапії підтверджено патоморфологічними дослідженнями органів, цитологіичними дослідженнями вмісту глікогену у клітинах печінки, що показали нормалізацію процесів вуглеводного обміну, та біохімічними дослідженнями системи оксиду азоту (NO) в тканинах серця, нирок та печінки експериментальних тварин. На моделі експериментального атеросклерозу у кролів визначена мінімальна доза рекомбінантної ДНК, що містить ген аполіпопротеїну А1 людини, введення якої прямою ін'єкцією у печінку під контролем УЗД, призводить до компенсації типових для атеросклерозу уражень тканин та судин модельних тварин, і показано, що введення цієї дози препарату кролям із штучною гіперхолестеринемією блокує розвиток атеросклерозу на фоні постійного навантаження холестерином впродовж 3х місяців експерименту. По другому напряму роботи відділу препарат рекомбінантного гормону росту людини було охарактеризовано на автентичність, ступінь чистоти та біологічну активність, результати яких відповідали вимогам Європейської Фармакопеї щодо лікарських препаратів. Показано, що, згідно одержаних характеристик, досліджуваний препарат рекомбінантного гормону росту можна вводити будь-яким модельним об'єктам, а також людині. За третім напрямом з використанням ЗТ-ПЛР технології клоновано у клітинах E.coli ген LIF людини та одержано його експресію. Показано біологічну активність рекомбінантного білку. Створено генетичну конструкцію для експресії LIF у еукаріотичних клітинах. Останній напрям пов'язаний з дослідженням впливу сукупного введення генів інтерлейкіну-2 та інтерлейкіну-12 миші у складі рекомбінантних конструкцій на гуморальну імунну відповідь, що індукується імунізацією створеними модельними ДНК-вакцинами. Показано, що гени інтерлейкіну-2 та інтерлейкіну-12 потенціюють протективну активність генних вакцин. Опис продукції Автори роботи Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити