Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0208U002817, 0107U010321 , Науково-дослідна робота Назва роботи Вивчення впливу мутацій регуляторних генів на біосинтез ліпоміцину культурою Streptomyces aureofaciens Tu117 Назва етапу роботи Керівник роботи Федоренко Віктор Олександрович, Доктор біологічних наук Дата реєстрації 19-02-2008 Організація виконавець Львівський національний університет імені Івана Франка, кафедра фізики металів Опис етапу Об'єкт досліджень - генетичні механізми регуляції біосинтезу ліпоміцину у S. aureofaciens Tu117. Метою даної роботи є вивчення функції імовірних регуляторних генів lipReg1, 2, 3, 4, 5 у біосинтезі антибіотика та встановлення можливих регуляторних механізмів цього процесу. Методи досліджень: спрямована інактивація та експресія досліджуваних генів, перенесення отриманих конструкцій в актиноміцетний штам за допомогою міжродової кон'югації з E. сoli, ДНК-ДНК гібридизація за Саузерном, полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР), зворотня транскрипція, високоефективна рідинна хроматографія (ВЕРХ). Цінні клінічні властивості антибіотиків визначають зацікавленість дослідників у вивченні механізмів біосинтезу цих сполук та регуляції їх утворення. Цікавим в цьому плані є штам S. aureofaciens Tu117 - продуцент полієнового антибіотика ліпоміцину, до складу кластеру генів біосинтезу якого входить п'ять генів (lipReg1, 2, 3, 4, 5) імовірно задіяних в регуляції цього процесу. Тоді як більшість кластерів біосинтезу вторинних метаболітів містить один або два регуляторних гени. Тому було цікаво встановити роль кожного із вище згаданих генів у складній системі регуляції біосинтезу ліпоміцину. У результаті виконаної роботи здійснено аналіз рівня біосинтезу полієнового антибіотика ліпоміцину штамами S. aureofaciens R1-3, S. aureofaciens R2-7, S. aureofaciens R3-7, S. aureofaciens R4-1, S. aureofaciens R5-1. Проведено комплементацію отриманих мутантів. Здійснено надекспресію генів lipReg1, lipReg2, lipReg3, lipReg4 та lipReg5 у штамі дикого типу S. aureofaciens Tu117 та проаналізовано рівень продукції ліпоміцину в отриманих рекомбінантних штамах. Проаналізовано експресію регуляторних (lipReg1, lipReg2, lipReg3, lipReg4 та lipReg5) та структурних генів (lipDig3, lipPks, lipNrps) в отриманих мутантах. Посилаючись на отримані нами результати ми можемо запропонувати імовірну модель регуляції біосинтезу ліпоміцину. Продукт гена lipReg4 безпосередньо координує експресію lip-генів і є ключо Опис продукції Автори роботи Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити