Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0209U005160, 0106U001274 , Науково-дослідна робота Назва роботи Гени актиноміцетів, що контролюють синтез агліконової частини ангуциклінових антибіотиків Назва етапу роботи Керівник роботи Федоренко Віктор Олександрович, Доктор біологічних наук Дата реєстрації 21-01-2009 Організація виконавець Львівський національний університет імені Івана Франка Опис етапу Об'єкт дослідження: гени та білки, що контролюють синтез аглікону ангуциклінових антибіотиків, їхнє подальше модифікування та експорт. У роботі використано штами актиноміцетів - продуцент ландоміцину Е Streptomyces globisporus 1912, продуцент ландоміцину А S. cyanogenus S136, урдаміцину А S. fradiae Tu2717 та їхні похідні сконструйовані в цій роботі. Мета роботи - експериментальна перевірка потенціалу низки структурних та регуляторних генів біосинтезу ангуциклінів для комбінаторного біосинтезу чи виявлення нових біоактивних сполук. Методи досліджень - клонування та секвенування генів, кон'югаційні схрещування, конструювання рекомбінантних ДНК, ДНК-ДНК гібридизація, полімеразна ланцюгова реакція, тонкошарова (ТШХ) та високоефективна рідинна хроматографії (ВЕРХ), виділення та очищення білків, мікроскопія. Отримано низку рекомбінантних штамів актиноміцетів, що надекспресують гени пізніх етапів біосинтезу ангуциклінів. Вперше виділено сполуки, що є глікозильованими похідними прежадоміцину. Вперше виявленосправжній акцепторний субстрат UrdGT2. Встановлено організацію і роль генів Streptomyces globisporus 1912 та S. cyanogenus S136, задіяних у пізніх етапах глікозилювання ландоміцинів та їхнього експортування. Вивчено гени транспортерів lndJ та lndW, що надають стрептоміцетам стійкості до ландоміцину Е. Завершено секвенування та аналіз регуляторних генів lanI, prx1, lndY, lndYR. Розроблено систему надпродукції глікозилтрансферази LndGT4. В S. cyanogenus експресія lanJlanZ1lanGT3lanZ2lanGT4 репресується LanK. Ландоміцини з довгими глікозидними ланцюгами (не менше трьох цукрів) блокують LanK. Ген lanK використано для біосенсорного виявлення відомих та нових сполук ландоміцинової родини з довгими глікозидними ланцюгами. За цим результатом подано заявку на патент України (зареєстровано 8.01.2008. № a200800261). Результати НДР можуть бути впроваджені при конструюванні, селекції та виявленні штамів актиноміцетів - продуцентів антибіотиків та в навчальному процесі під час підготовки фахівців генетиків та біотехнологів. Прогнозні припущення про розвиток об'єкту дослідження - розробка генно-інженерних технологій скринінгу та комбінаторного біосинтезу протипухлинних антибіотиків полікетидного походження. Опис продукції Автори роботи Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити