Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0211U004608, 0110U000232 , Науково-дослідна робота Назва роботи Молекулярно-генетичні механізми формування радіаційно-асоційованої онкогематологічної патології у постраждалих внаслідок аварії на Чорнобильській АЕС Назва етапу роботи Керівник роботи Клименко Сергій Вікторович, Доктор медичних наук Дата реєстрації 10-02-2011 Організація виконавець Державна установа "Науковий центр радіаційної медицини Академії медичних наук України" Опис етапу Об'єкт: мієлодиспластичний синдром/гостра мієлоїдна лейкемія, справжня поліцитемія, есенціальна тромбоцитемія та остеомієлофіброз в осіб, що зазнали дії іонізуючої радіації внаслідок аварії на ЧАЕС, та хворих без радіаційного анамнезу. Мета: визначення молекулярно-генетичних механізмів формування радіаційно-асоційованої онкогематологічної патології у постраждалих внаслідок аварії на ЧАЕС. Методи дослідження: клініко-гематологічні, молекулярно-генетичні, культуральні, імунологічні, статистичні. Визначено специфічність та чутливість використання наявності мутації JAK2 V617F в якості маркеру пухлинних захворювань мієлоїдної природи у хворих на спонтанну та радіаційно-асоційовану патологію. Опис продукції Методика визначення мутаційного статусу гену JAK2 V617F із застосуванням мультиплексної полімеразної ланцюгової реакції з алель специфічними праймерами. Для дослідження мутації V617 гену JAK2 використовували клітини периферичної крові із залученням методу алель-специфічної полімеразної ланцюгової реакції (АС-ПЛР). Виділення ДНК здійснювали за стандартним методом з використанням комерційного набору "QIAGEN" . Для дослідження кожної мутації використовували по три праймери (загальний, специфічний для мутантного алеля і специфічний для алеля дикого типу). Ампліфікацію проводили на термоциклері Gene-Amp PCR 2700, Applied Biosystem. ПЛР-суміш складалась з 1,5 ммол/л MgCl2, 0,2 ммол/л dNTPs та 1 од. Taq-полімерази Fermentas (Литва). Алель-специфічні праймери додавались в концентрації 1 мкмол/л для зворотнього праймеру та 0,5 мкмол/л для двох прямих праймерів. 100 нг геномної ДНК ампліфікували протягом 38 циклів. АС-ПЛР складалась з етапу денатурації (15 сек при 94С), анілингу (15 сек при 58С) та елонгації (30 Автори роботи Балан В. В. Дмитренко І.В. Клименко С. В. Костюкевич О.М. Любарець Т.Ф. Прокопенко І.М. Федоренко В.Г. Шолойко В.В. Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити