Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0212U000545, 0109U005586 , Науково-дослідна робота Назва роботи Структурна і функціональна організація апарату трансляції в цитоплазмі клітин людини Назва етапу роботи Керівник роботи Негруцький Б.С, Дата реєстрації 17-02-2012 Організація виконавець Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Опис етапу Вперше представлено експериментальні докази спільної властивості факторів елонгації та ініціації трансляції отриманих з різних джерел формувати неканонічні комплекси з деацильованими тРНК різної специфічності та ааРС. Вперше показано формування неканонічних комплексів деацильованих індивідуальних тРНК, специфічних до 9 різних амінокислот, з двома ізоформами фактора елонгації 1 ссавців - eEF1A1*ГДФ та eEF1A2*ГДФ. Вперше показано можливість формування комплексів [eEF1A*ГДФ*тРНК] в системі дріжджів за участю 3 індивідуальних тРНК. Методом мутаційного аналізу афінності рекомбінантних тРНК3Lys показано, що зміни в акцепторному та Т-стеблі тРНК можуть спричиняти лише незначні зміни в афінності, що здебільшого спостерігаються для eEF1A2. Вперше показано методом затримки смуги в ПААГ можливість формування четвертинного неканонічного комплекса [eEF1A*ГДФ*тРНКSer*СерРС] та значний стабілізуючий ефект eEF1A*ГДФ у комплексі [eEF1A*ГДФ*тРНКTyr*ТирРС-?С]. Вперше показано, що факто елонгації 1А здатен взаємодіяти із кальмодуліном, описана можлива функціональна роль такої взаємодії, що полягає у конкуренції із деацильованою тРНК за eEF1A. Вперше отримани кристали ізоформи eEF1A2 із високою роздільною здатністю, що будуть використані для побудови просторової структури фактора елонгації 1А ссавців. Представлені результати можуть бути використані для подальшого детального вивчення неканонічних взаємодій між компонентами апарату трансляції, що беруть участь у процесі каналювання субстратів у білковому синтезі, для пізнання нових механізмів регуляції біосинтеза білка еукаріотів, для отримання просторової структури фактора елонгації 1А. Опис продукції Отримані комплекси двох ізоформ eEF1A із тРНК девяти амінокислотних специфічностей. Отримані комплекси фактора ініціації eIF2 із ініціаторною і елонгаторною метіониновими тРНК. Визначені константи дисоціації цих взаємодій. Доказано формування комплексів фактора елонгації 1А із ініціаторною тРНК. Доказано формування комплексу ізоформи eEF1A1, на відміну від ізоформи eEF1А2, з регуляторним білком кальмодуліном. Автори роботи Бояршин К.С Веремєва М.В. Висловух А.А. Власенко Д.І. Гудзера О.Й. Коваленко М.І. Коваленко О.П. Крикливий І.А. Лукаш Т.О. Лукяненко Г.І Ляшенко І.А Новосильна О.В. Тукало М.А Футерник П.В. Шалак В.Ф. Яремчук Г.Д. Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити