Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0212U000723, 0111U007598 , Науково-дослідна робота Назва роботи Створення їстівних та кормових рослин, які містять білки з протитуберкульозними та антивірусними властивостями Назва етапу роботи Керівник роботи Кучук Микола Вікторович, Дата реєстрації 16-03-2012 Організація виконавець Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України Опис етапу Звіт про НДР: 29 с., 6 рис., 35 джерел. Об'єкт дослідження - плазмідна ДНК, рекомбінантні білки, рослини, транзієнтна експресія. Загальною метою роботи - є створення високоефективних генетичних конструкцій для продукції білків ESAT6 та Ag85В, які відіграють значну роль в формуванні імунної відповіді проти туберкульозу, та інтерферону людини альфа 2b і отримання на їх основі трансгенних модельних, їстівних та кормових рослин з високим рівнем експресії генів, що кодують високоімуногенні білки збудника туберкульозу та антивірусних білків. На даному етапі роботи метою було створити та проаналізувати генетичні конструкції з генами білків-стимуляторів імунної відповіді проти туберкульозу та із геном лейкоцитарного інтерферону для високоефективної експресії в рослинах, а також розроблення методик генетичної трансформації рослин векторами, що містять гени ESAT-6, Ag85B та інтерферону. Методи дослідження - клонування послідовностей ДНК, полімеразна ланцюгова реакція, генетична трансформація, транзієнтна експресія рекомбінантних білків в рослинах, електофоретичне розділення ДНК та білків, вестерн імуноблотинг та хроматографічне очищення білків. В результаті проведеної роботи було створено дві серії векторів - для агробактеріальної трансформації рослин та для експресії цільових білків в прокаріотичній системі. Для ядерної генетичної трансформації рослин створено бінарні конструкції pCB064, pCB067 та pCB158, що містили злиті в одну рамку зчитування послідовності генів esxA та fbpBdTMD, що кодують антигени Mucobacterium tuberculosis ESAT6::Ag85B(dTMD), та вектори pCB124, pCB125, pCB161 та pCB196, які містять ген інтерферону людини альфа 2b. Задля створення векторів для експресії цільових білків в прокаріотичній системі злиту послідовності генів esxA::fbpBdTMD, що кодує антигени ESAT6::Ag85B(dTMD), та ген інтерферону людини альфа 2b було клоновано в відповідних експресійних векторах. Розроблено ефективні методики генетичної трансформації рослин моркви, салату, рапсу та люцерни векторами, що містять гени ESAT-6, Ag85B та інтерферону. ГЕНЕТИЧНА ТРАНСФОРМАЦІЯ, AGROBACTERIUM, ТРАНЗІЄНТНА ЕКСПРЕСІЯ, ТРАНСГЕННІ РОСЛИНИ, РЕКОМБІНАНТНІ БІЛКІ, MUCOBACTERIUM TUBERCULOSIS, ТУБЕРКУЛЬОЗ, ЇСТІВНІ ВАКЦИНИ, ІНТЕРФЕРОН Опис продукції В ході виконання даного етапу проекту було створено та проаналізовано генетичні конструкції з генами білків-стимуляторів імунної відповіді проти туберкульозу та із геном лейкоцитарного інтерферону для високоефективної експресії в рослинах, а також розроблено методики генетичної трансформації рослин векторами, що містять гени ESAT-6, Ag85B та інтерферону. Автори роботи Василенко Максим Юрьевич Герасименко Ірина Михайлівна Кіщенко Олена Михайлівна Кучук Микола Вікторович Лучаківська Юлія Сергіївна Ніфантова Світлана Миколаївна Петерсон Антон Андрійович Сахно Людміла Олександрівна Шелудько Юрій Всеволодович Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити