Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0213U003129, 0109U000118 , Науково-дослідна робота Назва роботи Вивчення біорозпізнаючих властивостей мікро- і нанорозмірних обєктів на основі ферментів та генетично модифікованих клітин з метою розробки нових біоаналітичних методів. Назва етапу роботи Керівник роботи Гончар Михайло Васильович, Кандидат педагогічних наук Дата реєстрації 24-01-2013 Організація виконавець Iнститут біології клітини НАН України Опис етапу Об'єкт дослідження: біорозпізнавання, ферменти біоаналітичного значення, генетично модифіковані клітини дріжджів; біосенсорний аналіз, ензиматичний аналіз, L-аргінін, L-лактат, метиламін. Мета роботи: розробити нові аналітичні підходи для аналізу L-аргініну на основі рекомбінантної людської аргінази І (у поєднанні з уреазою), L-лактату - за допомогою L-лактат:цитохром с-оксидоредуктази, а також токсичного метиламіну на основі рекомбінантної метиламінооксидази. Методи дослідження: мікробіологічні, генно-інженерні, біохімічні, фізико-хімічні, ензиматичні. В результаті проведеної роботи: - сконструйовано експресійні плазмідні вектори, що несуть ген аргінази печінки людини ARG1 та tag-фрагменти - глутатіонтрансферазу GST або гістидиновий кластер (His)6, під контролем індуцибельного промотора гена CUP1 дріжджів. - pозроблено дешеві та ефективні методи очищення рекомбінантної аргінази за допомогою афінної хроматографії на носіях із ковалентно зв'язаним лігандом, синтезованих на основі макропористого скла. - pозроблено високоефективні методи іммобілізації ферментів біоаналітичного значення на мікро- та наночастинках різної природи (монодисперсних сферичних частинках на основі біосумісного полімера з привитими карбоксильними групами, феромагнітних та золотих наночастинках, моношарах ?-меркаптогексадеканової кислоти на поверхні золотих електродів) за допомогою поєднання карбодіімідного та пентафторфенольного методів активації СООН-груп. - на моделі алкогольоксидази і рекомбінантних ферментів - дріжджової L-лактат : цитохром с-оксидоредуктази (флавоцитохрому b2) та дріжджової метиламіноксидази, модифікованої гістидиновим кластером (His)6-tag, а також (His)6-тегованої людської аргінази І, проведено дослідження по оптимізації синтезу золотих, срібних та феромагнітних наночастинок, їх функціоналізації та ковалентної кон'югації з відповідними ферментами. - cтворено основи потенціометричного, амперометричного та ензиматичного методів визначення вмісту L-аргініну в реальних зразках за допомогою рекомбінантної аргінази. - вивчено можливість посилення каталітичної активності рекомбінантних клітин шляхом додаткового введення в них відповідних ферментів, кон'югованих з наночастинками золота. Опис продукції Біоаналітичні методи на основі ферментів та генетично модифікованих клітин, іммобілізованих на мікро- та нанорозмірних носіях. Автори роботи Гайда А.В. Гайда Г.З. Демків О.М. Закальська О.М. Закальський А.Є. Карковська М.І. Клепач Г.М. Куцяба В.І. Нечай Г.І. Прокопів Т.М. Романова М.Д. Смуток О.В. Стасюк Н.Є. Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити