Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0214U002204, 0112U003592 , Науково-дослідна робота Назва роботи НАДФН-оксидаза як потенційна біомішень і ключовий регулятор міграції і проліферації клітин. Назва етапу роботи Керівник роботи Комісаренко Сергій Васильович, Доктор біологічних наук Дата реєстрації 24-01-2014 Організація виконавець Інститут біохімії ім. О.В. Палладіна НАНУ Опис етапу Вперше отримано експериментальні дані, що засвідчують потенційну роль адаптерного протеїну Ruk/CIN85 у регулюванні функціональної активності НАДФН-оксидазного комплексу. Продемонстровано взаємодію Ruk/CIN85 з організатором НАДФН-оксидазного комплексу протеїном Tks4, з'ясовано механізми міжмолекулярної взаємодії. На моделях ліній пухлинних клітин із різним рівнем експресії Ruk/CIN85 встановлено залежність продукції активних форм кисню (АФК), опосередкованої функціонуванням НАДФН-оксидази, від рівня експресії досліджуваного адаптерного протеїну. Отримано рекомбінантні вектори HyPer-N1 та Ruk-HyPer-N1 для високоефективної експресії сенсорів пероксиду водню в клітинах ссавців, методом прижиттєвої мікроскопії виявлено співлокалізацію Ruk/CIN85 з продукуванням пероксиду водню. Опис продукції Експериментальні дані, що засвідчують потенційну роль адаптерного протеїну Ruk/CIN85 у регулюванні функціональної активності НАДФН-оксидазного комплексу. Отримано моноспецифічні поліклональні антитіла до рекомбінантного фрагмента GST-Tks4AB організатора НАДФН-оксидазного комплексу протеїну Tks4, показано високу ефективність їх роботи у Вестерн-блот аналізі, імунопреципітації, імунофлуоресцентній мікроскопії. Продемонстровано взаємодію SH3 доменів Ruk/CIN85 як з рекомбінантною, так і з ендогенною формами Tks4за допомогою GST in vitro pull-down аналізу. З використанням делеційних мутантів Tks4 встановлено, що ділянка між третім SH3 доменом та пролін-збагаченим районом Tks4 містить декілька консенсусних мотивів, важливих для взаємодії з SH3 доменами Ruk/CIN85. Встановлено, що адаптерний протеїн Ruk/CIN85 співімунопреципітується з Tks4 з лізатів клітин аденокарциноми прямої кишки людини лінії НТ-29. Конфокальною мікроскопією продемонстровано часткову співлокалізацію Tks4 та Ruk/CIN85 як в цитоплазмі, так і в Автори роботи Базалій Андрій Вікторович Грищенко Оксана Володимирівна Дробот Людмила Борисівна Петухов Дмитро Миколайович Шандренко Сергій Григорович Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити