Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0214U003617, 0113U002555 , Науково-дослідна робота Назва роботи Розробка та дослідна експлуатація портативного аналізатора на основі амперометричних ферментних біосенсорів для контролю якості напоїв у виноробстві. Розробка біосенсорних методів аналізу аргініну у вині за використання аргініно-гідролізуючих рекомбінантних ферментів. Назва етапу роботи Керівник роботи Сибірний Андрій Андрійович, Дата реєстрації 07-02-2014 Організація виконавець Iнститут біології клітини НАН України Опис етапу Об'єкти дослідження: рекомбінантні ферменти біоаналітичного значення - флавоцитохром b2 (ФЦ b2), гліцеролдегідрогеназа (ГДГ), аргіназа І, аргініндеіміназа (АДІ). Мета НДР: розробити біосенсорні методи аналізу аргініну у винах за використання аргініно-гідролізуючих рекомбінантних ферментів. У результаті проведеної у 2013 р. роботи: отримано в препаративних кількостях клітини рекомбінантних штамів-продуцентів з підвищеним вмістом цільових ферментів; здійснено препаративне виділення та хроматографічне очищення ферментів з рекомбінантних мікроорганізмів. ФЦ b2 дріжджів Hansenula polymorpha та аргіназу І печінки людини (аргіназа) виділено з клітин штамів дріжджів H. polymorpha "tr1" та NCYC 495 pGAP1-HsARG1(leu2car1 Sc:LEU2), відповідно; АДІ Mycoplasma hоminis - з клітин E. coli BL-21; ГДГ H. рolymorpha - з клітин трансформанта W303 (HpGDH) Saccharomyces cerevisiae. Препарати ГДГ, АДІ та ФЦ b2 передано в ІМБіГ НАНУ для забезпечення партнера по НДР ферментами, необхідними для виконання НДР; оптимізовано методи іммобілізації аргінази, АДІ і медіаторів на поверхнях амперометричних перетворювачів; за використання препаратів аргінази розроблено, опрацювано та апробовано на реальних зразках вин ензиматичні методи визначення аргініну. За результатами НДР опубліковано 3 статті і 4 тез. Опис продукції Отримано в препаративних кількостях біомасу клітин мікроороганізмів - рекомбінантних штамів-продуцентів з підвищеним вмістом цільових ферментів - для їх препаративного виділення та хроматографічного очищення . Ферменти одержано, охарактеризовано та забезпечено ними партнера по НДР (ІМБіГ НАН України) для створення мультибіосенсорних аналізаторних приладів на основі амперометричних ферментних біосенсорів. Оптимізовано методи іммобілізації аргініно-гідролізуючих ферментів і медіаторів на поверхнях амперометричних перетворювачів; за використання аргінази та аргініндеімінази розроблено лабораторні прототипи біосенсорів на L-аргінін. Розроблено та опрацьовано ензиматичні методи аналізу аргініну за використання аргінази. Розроблені методи апробовано на реальних зразках вин та показано надійну кореляцію запропонованих методів із референтним хімічним методом. Автори роботи Іваш М.Ф. Борецький Ю.Р. Гайда Г.З. Гончар. М.В. Карковська М.І. Свінтозельська М.М. Стасюк Н.Є. Фаюра Л.Р. Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити