Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0214U005450, 0109U007245 , Науково-дослідна робота Назва роботи Вивчення молекулярних основ точності трансляції генетичного коду в процесі утворення аміноацил-тРНК Назва етапу роботи Керівник роботи Тукало Михайло Арсентійович, Доктор біологічних наук Дата реєстрації 30-12-2014 Організація виконавець Інститут молекулярної біології і генетики Опис етапу Виконані дослідження механізмів редагування помилкових продуктів аміноацилювання лейцил-тРНК синтетазою T.thermophilus, проліл-тРНК синтетазою E. faecalis і D-тирозил -тРНКTyr деацилазою T.thermophilus. Із використанням біохімічних методів, генної інженерії, сайт-спрямованого мутагенезу, модифікації тРНК, комп'ютерного моделювання та квантовохімічних розрахунків показано, що редагувальна активність ЛейРСТТ спрямована проти природних не протеїногенних аналогів лейцину (норваліну і норлейцину). Редагування протеїногенних амінокислот здійснюється переважно у каталітичному домені ЛейРСТТ пре-трансферним шляхом, тобто через гідроліз відповідних аміноацил-аденилатів. Запропоновано тРНК-асистований механізм пост-трансферного редагування для ЛейРС прокаріотів. Вперше, для аміноацил-тРНК синтетеаз 2-го структурного класу, виявлено тРНК-залежне пре-трансферне редагування помилок проліл-тРНК синтетазою E, faecalis, яке опосредковане 2'- і 3'- гідроксильними групами А76 тРНКPro. Показано структурно-функціональну організацію редагувального активного центру ПроРСEF в комплексі з аланіл-тРНКPro і встановлено механізм її каталізу деацилювання . Найважливішим функціональним елементом цього механізму є 2'-OH А76 аланіл-тРНКPro, яка відіграє ключову роль в субстрат-асистованому каталізі. Показано, що D-тирозил-тРНКTyr деацилаза гідролізує помилково утворений D-тирозил-тРНКTyr. Методом молекулярної динаміки вивчено структуру комплексу D-тирозил-тРНКTyr деацилази із T. themophilus з D-тирозил-A76 тРНКTyr та визначено ключові амінокислоти активного центру ферменту для подальшого вивчення механізму деацилювання методом сайт cпрямованого мутагенезу. Опис продукції Отримано 9 мутантних форм лейцил-тРНК синтетази Thermus thermophilus. Отримано 11 мутантних форм проліл-тРНК синтетази Enterococcus faecalis Автори роботи Бояршин Костянтин Сергійович Гудзеpа Ольга Йосипівна Кpикливий Іван Андрійович Коваленко Оксана Петрівна Яpемчук Ганна Дмитрівна Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити