Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0214U006738, 0113U003164 , Науково-дослідна робота Назва роботи Дослідити ефективність застосування методів антивірусної обробки у технології виділення та очищення білкових факторів плазми крові з використанням афінної хроматографії на макропористих кремнеземних сорбентах Назва етапу роботи Керівник роботи Даниш Тарас Васильович, Дата реєстрації 12-02-2014 Організація виконавець Державна установа "Інститут патології крові та трансфузійної медицини АМН України" Опис етапу Об'єкти дослiдження: фракції плазми крові за Коном, вірусінактивація, тіоціанатний метод, біоспеціфічні кремній-неорганічні сорбенти, фактори згортання та фібринолізу. Мета роботи: визначення основних етапів застосування хімічних методів інактивації вірусів в процесі технологічного одержання білкових препаратів крові з використанням методів попереднього фракціонування та афінної хроматографії на макропористих кремнеземних носіях. Методи: фракціонування, вірусінактивація хімічними агентами, біоспецифічна та гель-проникна хроматографія, центрифугування, ультрадіафільтрація, електрофорез та ін. В результаті виконання роботи одержані наступні науково-практичні результати: вперше в технологію переробки плазми крові на окремі білкові продукти з використанням фракціонування за Коном, сольового та ПЕГ-переосадження, а також хроматографічного очищення на біоспецифічних барвник-кремнеземних макропористих сорбентах, впроваджено тіоціанатний метод інактивації вірусів; застосування для вірусної інактивації в одній технологічній схемі різних за механізмом впливу хімічних агентів (спиртового, ПЕГ-осадження, тіоціанатного, сольвент-детергентного) за рахунок їх синергізму значно збільшує кінцевий антивірусний ефект препаративного одержання білкових препаратів; розроблено простий у використанні фотометричний експрес-метод визначення вмісту тіоціанатів у продуктах переробки плазми, що дозволяє проводити вимірювання концентрації у діапазоні 0,0005-0,005 моль/л; вивчено та експериментально доведено зворотню негативну дію досліджуваних інактивуючих агентів на активність факторів згортання крові та фібринолізу; досліджено ефект вірусінактивуючих реагентів на сорбційні властивості макропористих кремній-неорганічних сорбентів різної специфічності; обгрунтовано можливість застосування тіоціанатів не тільки для антивірусної обробки, але і для специфічної елюції білкових компонентів з хроматографічних сорбентів; для видалення тіоціанатів з білкових розчинів запропоновано використання методів преципітації, діалізу, ультрадіафільтрації, гель-проникної хроматографії; в експерименті доказано відсутність залишкового вмісту вірусінактивуючих агентів у кінцевих білкових продуктах; створено лабораторний регламент застосування солей тіоціанату у технології одержання факторів згортання крові та фібринолізу Опис продукції Плазму крові заморожують, витримують протягом певного часу при мінус 40 оС. Після розморозки кріопреципітат розчиняють, центрифугують для видалення нерозчинних частинок і здійснюють негативну афінну хроматографію на макропористому сорбенті з лігандом-барвником для одержання очищеного фактора згортання крові VIII. Кріосупернатант фракціонують за допомогою сольового переосадження, піддають вірусінактивації сольвент-детергентним та тіоціанатним методами в присутності поліетиленгліколю та проводять хроматографічне розділення факторів протромбінового комплексу, а також білків фібринолітичної системи на біоспецифічних кремній-неорганічних сорбентах з лігандами-барвниками. Автори роботи Вороняк М.І. Гузовата Н.А. Даниш Т.В. Деркач С.В. Дульцева Н.А. Дяків Х.І. Мадич С.Є. Орлова Л.В. Рокошевська М.С. Шурко Н.О. Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити