Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0214U008024, 0113U003764 , Науково-дослідна робота Назва роботи Дослідження явища надшвидкого охолодження біологічних об'єктів для створення приладу для кріоконсервування. Назва етапу роботи Керівник роботи Сидоренко Михайло Васильович, Дата реєстрації 03-06-2014 Організація виконавець Державна установа "Відділення біотехнічних проблем діагностики Інституту проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Опис етапу РЕФЕРАТ.Звіт про НДР: 57 стор., 12 рис., 6 табл., 35 джерел. Об’єкт дослідження: клітини, кріопротекторні засоби. Мета роботи: вивчити ефективність поєднання різних кріопротекторних засобів, що використовуються в кріозахисних розчинах, для запобігання холодовому пошкодженню клітин. Дослідити вплив різних концентрацій ДМСО (25-5% в кінцевій концентрації) у поєднанні з фетальною бичачою сироваткою (ФБС) в різних концентраціях (25-40%) та непроникаючих кріопротекторів: гліцерину, етиленгліколю, глюкози. В результаті було розроблено кілька протоколів заморожування без використання методу вітрифікації для подальшого порівняння отриманих даних з тими, що будуть отримані при надшвидкому заморожуванні клітин. Методи дослідження та апаратура: кріопротекторні розчини складалися з поживного середовища, сироватки, ДМСО, глюкози, гліцерину, етиленгліколю у різних співвідношеннях. При додаванні КР використовували два різних протоколи. Протокол 1 полягає у одночасному додаванні до клітинної суспензії кріорозчину та послідовне зниження температури. Кріозахисний розчин №1 (КР №1) охолоджений до +4°С, повільно додавався до охолодженої до 200 С клітинної суспензії в співвідношенні 1:1. Після цього, клітинна суспензія з КР №1 охолоджувалася до +4°С протягом 30 хвилин при + 20С, потім протягом 30 хвилин при – 30С та протягом ночі охолоджувалася до -800С. Згідно протоколу 2 використовували спочатку першу частину кріоконсерванту КР №2, охолоджену до +4о С, яку додавали до клітинної суспензії в співвідношенні 1:1. Зразки були охолоджені при температурі +4оС 30 хвилин. Потім до кріоампул додавалася друга частина кріопротектора в співвідношенні 2:1, температурою -2оС. Після цього, клітинна суспензія з КР №2 охолоджувалася протягом 30 хвилин при – 30С та протягом ночі охолоджувалася до -800С. Результати та їх новизна: відповідно до отриманих результатів, протокол 2 виявився більш ефективним, ніж протокол 1, для всіх складів кріопротекторів. Це можна пояснити поступовим зниженням температури клітинної суспензії з відкладеним додаванням проникаючого кріопротектора ДМСО. Відомо, що при зниженні температури клітини до +4оС метаболічні процеси в клітині зупиняються. В такому стані клітинні органели та ферментні системи менше піддаються шкідливому впливу ДМСО, що підвищує загальну виживаність клітин. З чотирьох досліджених складів кріорозчинів найбільшу протекторну дію, щодо клітин мав розчин, який включав до свого складу 200мМ глюкози та 5% ДМСО. В подальшому отримані результати будуть використані для визначення ефективного способу надшвидкого охолодження та збереження клітин. Ключові слова: життєздатність клітин, заморожування, ДМСО, глюкоза, гліцерин, етиленгліколь. Опис продукції Макетний зразок приладу для надшвидкого охолодження біооб'єктів складається зі сталевогого каркасу ДШВ=60;40;69 см. В ньому змонтовано пневморозподілювач П-РК32, вакуумний насос з асинхронним 3-х фазовим двигуном 2НВР-5ДМ, предметний стіл з нержавіючої сталі, ємність(термос) для рідкого азоту, електрореле ВА-2001-3/2 , електронний блок для вимірювання температури, система шлангів. Автори роботи Бурлака Дмитро Петрович Дем'яненко Дмитро Петрович Сидоренко Михайло Васильвич Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити