Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0214U008367, 0110U006325 , Науково-дослідна робота Назва роботи Дослідження селективної автофагійної деградації органел та цитозольних білків у дріжджів Pichia pastoris та Saccharomyces cerevisiae Назва етапу роботи Керівник роботи Сибірний Андрій Андрійович, Дата реєстрації 22-12-2014 Організація виконавець Iнститут біології клітини НАН України Опис етапу Незважаючи на те, що більшість автофагійних процесів вивчаються на моделі дріжджів P. pastoris, процес мітофагії для цього організму залишається невідомим. На даному етапі роботи було отримано рекомбінантні штами дріжджів P. pastoris, які несуть гібридний ген omp85 P. pastoris з геном GFP, що кодує зелений флюорисцентний білок. Дані рекомбінантні штами було одержано на основі дикого штаму P. pastoris GS200, а також на базі безпротеазного мутанта P. pastoris SND1163. Далі було проведено серію експериментів по підбору умов для ефективної деградації F1?-субодиниці мітохондріальної АТФази. Для цього клітини дикого типу та мутантні штами дріжджів P. pastoris підрощувалися за умов індукції мітофагії на мінімальному середовищі YNB з 1,5% гліцерином протягом 5 діб. Потім готувалися зразки для імуноблот аналізу із антитілами до зеленого флюорисцентного білка GFP. Аналізуючи результати Вестерн-блот аналізу можна визначити час та ступінь деградації мітохондрій у метилотрофних дріжджів P. pastoris. Опис продукції Сконструйовано плазміди та рекомбінантні штами дріжджів P. рastoris, які використовуються для дослідження процесу мітофагії у метилотрофних дріжджів. Автори роботи Дмитрук Олена Валеріївна Левків Катерина Олександрівна Сибірний Андрій Андрійович Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити