Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0215U008229, 0110U000693 , Науково-дослідна робота Назва роботи Дослідження мультибілкових трансляційних нанокомплексів та їх компонентів Назва етапу роботи Керівник роботи Негруцький Б.С., Доктор біологічних наук Дата реєстрації 22-12-2015 Організація виконавець Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Опис етапу Біосинтез білка у вищих евкаріотів є мультикомпонентим процесом, у якому беруть участь декілька великих фізично з'єднаних білкових угруповань, серед яких аміноацил-тРНК синтетазний комплекс MARS і комплекс факторів елонгації eEF1A . Нами було встановлено, що швидкість дифузії аміноацил-тРНК синтетаз у живій клітині є істотно уповільненою в порівнянні із білком GFP і залежить від інтактності актинового цитоскелету та взаємодії із рибосомами, що є першим свідченням компартменталізації трансляційного апарату людини, отриманим в живих клітинах. Показана відсутність координації змін кількості різних субодиниць трансляційного комплексу eEF1B в злоякісних пухлинах людини як на рівні мРНК, так і на рівні білка, що є першим свідченням про існування в тканинах людини вільних від комплексу субодиниць eEF1B та вказує на можливу регуляторну роль індивідуальних субодиниць eEF1B при канцерогенезі. Показано, що вміст субодиниць eEF1H підвищується більш ніж в два рази в 72% кардіоезофагеальних пухлин і 52% карцином легені, і залишається без змін в карциномах нирки, що свідчить про певну специфічність таких змін. Вперше виявлено порушення в системі метилування eEF1A у пухлинних тканинах та ідентифіковано залишки лізину в молекулі eEF1A, метилування яких змінюється. Висунуто гіпотезу, що зміни рівня метилування цих залишків може впливати на взаємодію eEF1A із певними білками-партнерами у пухлинних клітинах, що може бути механізмом проявлення відомої онкогенної функції eEF1A. Вперше продемонстровано різну здатність ізоформ eEF1A1 i eEF1A2 до формування димерів, причому просторова структура димерів ізоформи eEF1A1 є менш компактною, ніж димерів онкогенної ізоформи eEF1A2. Показано, що тільки eEF1A1 здатен взаємодіяти із сигнальним білком кальмодуліном у кальцій-залежний спосіб і локалізовано сайт зв'язування. Наведено докази, що кальмодулін і тРНК конкурують за зв'язування з eEF1A1. Представлено дані, що обидві ізоформи eEF1A здатні по різному взаємодіяти із актиновими філаментами із формуванням скруток. Показано, що кальмодулін перешкоджає eEF1A1 скручувати актинові філаменти, що може бути додатковим механізмом участі кальція в регуляції актинового цитоскелету. Розроблено процедури отримання препаративних кількостей субодиниць eEF1Bа, eEF1Bb i eEF1Bg комплексу факторів трансляції eEF1B. Одержані свідчення на користь того, що всі субодиниці цього комплексу є неглобулярними білками і демонструють подовжену форму в розчині. Реконструйовано комплекс eEF1B та його складові -міні-комплекси eEF1Ba*eEF1Bg і eEF1Bb*eEF1Bg in vitro Опис продукції В результаті роботи були висунуті нові гіпотези, розроблені процедури отримання компонентів комплексу та опубліковані нові наукові данні, що розширюють уявлення про принципи існування високомолекулярних трансляційних комплексів в клітинах людини в нормі і при патології, регуляції і стабільності таких комплексів, стехіометрії і просторової організації як самого комплексу eEF1B, так і окремих його компонентів Автори роботи Вісловух А.А. Веремєва М. В. Власенко Д. І. Гавриленко С. С. Капустян Л. М. Коваленко М. І Новосильна О. В. Порубльова Л В Тросюк Т. В. Шалак В Ф Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити