Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0215U008525, 0111U003811 , Науково-дослідна робота Назва роботи 1. Розробка і використання молекулярних методів ідентифікації шкодочинних організмів, трансгенних конструкцій та генотипів картоплі з метою паспортизації сортів і вивчення генетичної мінливості в процесі оздоровлення Назва етапу роботи Керівник роботи Олійник Тетяна Миколаївна, Дата реєстрації 28-12-2015 Організація виконавець Інститут картоплярства УААН Опис етапу Модифіковано методику виділення ДНК та проведено модифікацію методики Boonham N. для якісного виділення РНК із листків польових рослин картоплі. Апробовано три методики виділення ДНК із бактерій R. solanacearum. Апробовано методику виділення плазмідної ДНК із агробактеріальних штамів. Підібрано праймери для діагностики Х, М та Y- вірусів картоплі у пробіркових рослинах картоплі. Відпрацьовано умови проведення полімеразної ланцюгової реакції зі зворотною транскрипцією та показано можливість проведення мультиплексної реакції. Апробовано тест-систему на основі двостадійної ЗТ-ПЛР для діагностики ВВБК та вірусних хвороб рослин картоплі. Проведено оптимізацію умов та підбір концентрацій реагентів реакційної суміші методів RAPD- та ISSR-ПЛР з метою виявлення молекулярно-генетичного поліморфізму оздоровлених ліній. Показано можливість проведення ISSR-ПЛР з використанням трьох ISSR праймерів, скомбінованих в одній реакції. Відпрацьовано умови діагностики бурої бактеріальної гнилі картоплі R. solanacearum. Проведено RAPD-аналіз 9 штамів R. solanacearum, BOX-ПЛР та здійснено кластеризацію 10 штамів R. solanacearum. Оптимізовано умови проведення ПЛР-аналізу для детекції генетичних конструкцій, що містять ген неоміцинфосфотрансферази nptII та промотор 35S ВМКК. Опис продукції Отримано оздоровлений насіннєвий матеріал картоплі методом верхівкової мерістеми -- 80 безсимптомних ліній Підібрано інформативні молекулярно-генетичні маркери для порівняльного визначення внутрішньовидового поліморфізму геномів рослин картоплі в процесі оздоровлення. Для діагностики X, Y та M вірусів картоплі підібрано праймери та відпрацьовано оптимальні умови проведення RT-PCR. З метою ідентифікації трансгенних рослин картоплі підібрано умови проведення реакції ампліфікації та використано праймери до генів 35S і nptII. Проведено RAPD-аналіз 9 штамів R. solanacearum. Згідно отриманих результатів побудовано дендрограму, яка представлена двома основними кластерами. Штами першого біовару проявили генетичну спорідненість. Проведено BOX-ПЛР та здійснено кластеризацію 10 штамів R. solanacearum. Автори роботи Грицай Роман Васильович Слободян Сергій Олександрович Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити