Реєстраційний номер
0216U000026,
0114U006179
, Науково-дослідна робота
Назва роботи
Визначити зміни рівня експресії трансформуючого фактора росту бета у клітинах культивованих гліом за умов антипроліферативного впливу супернатанту фетальних нейрогенних клітин щура
Назва етапу роботи
Керівник роботи
Семенова Віра Михайлівна,
Дата реєстрації
14-01-2016
Організація виконавець
Державна установа "Інститут нейрохірургії імені академіка А. П. Ромоданова"
Опис етапу
Звіт про НДР: 35 сторінок, 3 таблиці, 7 рисунків, 30 джерел. Об'єкт дослідження - культури клітин гліом мозку щура 101.8 та С6. Мета роботи - дослідження зв'язку антипроліферативного впливу супернатанту нейрогенних клітин фетального мозку із станом TGF-бета -сигналінгу в культурі пухлинних клітин експериментальної гліоми мозку щурів. Методи дослідження: культивування пухлинних клітин, імуноцитохімічний аналіз маркерів клітин, морфометричний аналіз, імуноферментний аналіз, статистичні методи. Встановлено, що супернатанти нейрогенних клітин (СНК), отримані з фетального мозку як раннього (Е8-11), так і більш пізнього (Е12-16) терміну гестації, виявили цитотоксичну дію на короткострокові культури клітин гліоми 101.8 та С6, ступінь якої був дозозалежним та посилювався із збільшенням тривалості інкубації культур з СНК. СНК (Е12-16) виявив більш виражену цитотоксичну дію на культивовані клітини гліоми 101.8 та С6, порівняно з СНК (Е8-11). Показник цитотоксичного індексу (ЦІ) СНК (Е12-16) стосовно клітин гліоми 101.8 та С6 достовірно перевищував ЦІ, визначений у суспензіях клітин нормального мозку щура. Після впливу СНК (Е8-11) на первинні культури гліоми 101.8 та С6 спостерігались ознаки дозозалежної цитотоксичності: розрідження зони росту, поява дистрофічних та некробіотичних змін у пухлинних клітинах, зниження мітотичного індексу, що посилювались за умов впливу СНК (Е12-16). За умов дії СНК, порівняно з контрольними спостереженнями, знижувався середній показник ядерно-цитоплазматичного співвідношення у пухлинних клітинах, зменшувалась частка клітин з множинними ядерцями та клітин, імунопозитивних на Ki-67 (у 2,7 разу). Виявлено зв'язок зміни рівня експресії TGF- бета1 у клітинах культивованих гліом з рівнем експресії маркера проліферації Кі-67 за умов антипроліферативного впливу СНК щура (r = 0,253). Наукова новизна. СНК фетального мозку щура виявляє дозозалежний цитотоксичний та антипроліферативний вплив на культивовані клітини гліоми 101.8 та С6, який посилюється при збільшенні терміну гестації щура та тривалості інкубації культур з СНК. Передумовою такого впливу, ймовірно, є здатність нейрогенних прогеніторних клітин до продукції речовин з протипухлинною дією. Практична значимість. Встановлений антипроліферативний ефект СНК може стати основою для теоретичного обгрунтування комплексної патогенетичної терапії у хворих з гліомами із застосуванням препаратів, отриманих з фетальних нейрогенних клітин. ПРОГЕНІТОРНІ НЕЙРОГЕННІ КЛІТИНИ, ФЕТАЛЬНИЙ МОЗОК ЩУРА, СУПЕРНАТАНТ, КУЛЬТУРИ ПУХЛИННИХ КЛІТИН, ГЛІОМА С6, ГЛІОМА 101.8, КІ-67, ЦИТОТОКСИЧНИЙ ІНДЕКС, МІТОТИЧНИЙ ІНДЕКС, ПРОЛІФЕРАТИВНИЙ ІНДЕКС, АНТИПРОЛІФЕРАТИВНИЙ ЕФЕКТ.
Опис продукції
Спосіб оцінки антипроліферативної дії препарату з клітин фетального мозку на клітини культивованих гліом полягає в тому, що до первинної культури клітин гліоми мозку з рівномірною зоною росту (на 6-8-у добу) додають супернатант нейрогенних клітин фетального мозку у концентрації 0,10 мг/мл, інкубують в СО2-інкубаторі протягом 48 год. Для морфологічного дослідження культури фіксують 10% формаліном та проводять імуноцитохімічний аналіз на маркер проліферації Кі-67.
Автори роботи
Васлович В.В.
Любич Л.Д.
Малишева Т.А.
Стайно Л.П.
Додано/оновлено в НРАТ
2020-04-02
