Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0216U003442, 0111U003386 , Науково-дослідна робота Назва роботи Розробка методів добору матеріалу соняшнику (Helianthus annuus L.) з цінними господарськими ознаками, включаючи стійкість до вовчка (Orobanche cumana Wallr.) з використанням сучасних методів досліджень Назва етапу роботи Керівник роботи Попов Віталій Миколайович, Дата реєстрації 03-03-2016 Організація виконавець Інститут рослинництва ім. В.Я. Юр'єва Національної академії аграрних наук України Опис етапу Об'єкт дослідження - генетичне різноманіття вихідного матеріалу соняшнику за ДНК маркерами. Мета роботи - визначення активності ферментів, індукції подвоєних гаплоїдів та встановлення поліморфізму ДНК-маркерів у різноманітному вихідному матеріалі соняшнику. Методи - польові, біохімічні (визначення активності ферментів), біотехнологічні, молекулярно-генетичні (полімеразна ланцюгова реакція), статистичні. Активність каталази, поліфенолоксидази та пероксидази у досліджених зразків соняшнику була вищою ніж у стандарту сприйнятливості. Визначення активності ферментів на різних етапах селекційного процесу можна використовувати тільки як непрямий метод оцінки вихідного матеріалу соняшнику не тільки до вовчка, але й інших збудників хвороб. Розроблено біохімічну методику визначення стійкості соняшнику до вовчка за активністю каталази (Патент № UA79519U від 25.04.2013.Спосіб прискореного визначення стійкості зразків соняшнику до вовчка (Orobanche cumana). Схрещування ліній культурного соняшнику та дикорослих видів дозволили створити міжвидові гібриди. Вихідні генотипи мають різну андрогенну здатність. У деяких зразків міжвидових гібридів ідентифікована ознака жовте забарвлення верхівки рослини. Показано, що ця ознака контролюється одним геном. Вона успадковується незалежно щодо ознак гіллястості, забарвлення крайових квіток та відновлення фертильності пилку. Проаналізовано поліморфізм 16 мікросателітних локусів у вибірці інбредних ліній соняшнику селекції Інституту рослинництва ім. В.Я. Юр'єва. Число алелей варіювало від 1 до 3. Всього в загальній виборці ідентифіковано 35 алелей. Очікувана гетерозиготність склала 0,405±0,042. Показано, що алельне різноманіття відрізнялося залежно від типу інбредних ліній. Найменше середнє число алелей на один мікросателітний локус було у мутантних ліній (1,47±0,52). Показник очікуваної гетерозиготності у мутантних, материнських та батьківських ліній становив 0,120±0,059; 0,356±0,047; 0,389±0,055, відповідно. Число алелей у зразків міжвидових гібридів варіювало від 1 до 3. Всього в загальній виборці ідентифіковано 27 алелей. В середньому на кожний мікросателітний локус приходилося 2,07±0,48 алеля. Очікувана гетерозиготність склала 0,241±0,079. Встановлено поліморфізм за маркерами у інбредних ліній соняшнику, які зчеплені з генами Or5 та Rf1. Показано, що маркери HRG01 та HRG02 в F2 розщеплюються із співвідношенням класів 3:1. В іншій комбінації схрещування розщеплення становило 1:1. Аналіз зчеплення між маркерами HRG01, HRG02 та геном Rf1, показав що вони розташовані в одній групі зчеплення на відстані 9,0±2,7 (комбінація 1) та 7,0±2,3 % рекомбінації (комбінація 2) для пари HRG01-Rf1, а також 5,0±1,9 (комбінація 1) та 10,0±2,8 % рекомбінації (комбінація 2) для пари HRG02-Rf1. Проаналізовано внутрішньосортовий розподіл алелів локусів RTS05 та HRG01. Виявлено, що алель 650 пн. локусу RTS05 зустрічається в сортах соняшнику з високою частотою, яка у більшості досліджених сортів перевищує 0,500. Алель 426 пн. локусу HRG01 розповсюджений лише у 12 (30 %) сортів соняшнику. На основі отриманих результатів опубліковано Методичні рекомендації щодо ідентифікації гена Or5 стійкості соняшнику до вовчка (Orobanche cumana Wallr.) за SCAR-маркером RTS05 (Інститут рослинництва, 2015) та методику добору генотипів соняшнику за молекулярними маркерами (0111U003386) (Інститут рослинництва ім. В.Я. Юр'єва, лабораторія селекції та генетики соняшнику, акт №01/12 від 07.09.2012). ISSR-аналіз генетичного різноманіття сортів соняшнику дозволив виявити 110 фрагментів, з яких 95 були поліморфними, що склало 86,4 %. Варіабельність поліморфізму сортів соняшнику була в межах 50,0-100 % (при використанні праймерів UBC-02 та UBC-834, UBC-842 відповідно). В результаті використання кластерного методу для угрупування сортів соняшнику побудовано дерево, на якому усі сорти розташовано у двох кластерах. Проведено валідацію комп'ютерних програм для аналізу генетичних даних, за результатами якої опубліковано методичні рекомендації щодо статистичного аналізу генетичних даних с використанням комп'ютерних програм Arlequin, Philyp, Clann, Structure, які впроваджено в Інституті рослинництва ім. В.Я. Юр'єва (акт № 49/14-В від 16.06.14), Львівському національному університету ім. І. Франка (акт № 3 від 17.06.14), Миколаївському національному аграрному університеті (акт № 1 від 26.06.14), Чернівецькому національному університеті (акт № 4 від 30.06.14). Сфера використання результатів розробки: селекція інбредних ліній соняшнику Опис продукції Науково-технічна продукція представлена патентами, методичними рекомендаціями та методиками з використання молекулярно-генетичних та статистичних методів для оцінки селекційного матеріалу соняшнику Автори роботи Акініна Галина Євгенівна Задорожна Ольга Анатоліївна Сахно Тамара Володимирівна Твердохліб Олена Володимирівна Тереняк Юлія Миколаївна Шарипіна Ярослава Юріївна Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити