Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0216U005599, 0111U000466 , Науково-дослідна робота Назва роботи Вивчити молекулярно-генетичні властивості ентеровірусів свиней, закономірності мінливості та гетерогенності ентеровірусних популяцій Назва етапу роботи Керівник роботи Романенко Володимир Пилипович, Дата реєстрації 05-02-2016 Організація виконавець Інститут ветеринарної медицини НААН Опис етапу Об'єкти дослідження: свинарські господарства різних регіонів України; свині різного віку; проби ректальних змивів; сироватки крові свиней; ізоляти вірусів; референтні та епізоотичні штами ентеровірусів свиней, бляшкові клони, специфічні сироватки крові; сироватка крові коня, свиней, кролів; культура клітин СНЕВ. Мета роботи: вивчити молекулярно-генетичні властивості ентеровірусів свиней, закономірності мінливості та гетерогенності ентеровірусних популяцій: Етап 1: провести моніторингові дослідження та виділення ізолятів ентеровірусів свиней в різних регіонах України, вивчити їх культуральні і біохімічні властивості. Етап 2: вивчити молекулярно-генетичні властивості виділених ізолятів ентеровірусів свиней. Етап 3-4: вивчити антигенну спорідненість виділених штамів ентеровірусів в порівнянні з антигенними властивостями референтних штамів ентеровірусів свиней колекції лабораторії імуногенетики ентеровірусів свиней ІВМ НААН. Етап 5: встановити праметри визначення молекулярно-генетичних властивостей ентеровірусів свиней. Методи дослідження: обробка відібраних проб матеріалів по методу Bogel та Mayer; виділення з них ізолятів вірусів на культурі клітин СНЕВ; визначення інфекційної активності виділених ізолятів та референтних штамів ентеровірусів свиней у культурі клітин СНЕВ методом титрування; визначення типової належності виділених ізолятів згідно розробленого В. П. Романенко методу (авт. Св. № 1007226 від 23 ноября 1982 р.) в титровано-типованих пасажах у реакції нейтралізації; визначення в реакції нейтралізації рівня антитіл у сироватках крові. Результати: проведено епізоотичне обстеження чотирьох свинарських господарств, благополучних по ентеровірусним хворобам свиней. Відібрано для серологічних та вірусологічних досліджень 85 проб крові та 85 проб ректальних змивів від клінічно здорових свиней даних господарств. З 85 проб ректальних змивів виділено 20 ізоляти вірусів, котрі були проведені в трьох послідовних пасажах на культурі клітин СНЕВ, визначена їх цитопатична та інфекційна активність у культурі клітин СНЕВ. Для визначення типової належності виділених ізолятів вірусів проведені титровано-типовані пасажі з різними специфічними імунними сироватками до ентеровірусів свиней різних серотипів. З метою визначення родової та видової належності виділених ізолятів вірусів вивчені їх фізико-хімічні властивості: чутливість до ефіру і трипсину, терморезистентність (стійкість до нагрівання при 56?C протягом 1 години без і в присутності 1 М MgCl2 ), стійкість до середовищ з різними значеннями рН. Визначена імунна відповідь свиней на циркулюючі в даних господарствах ентеровіруси в пробах сироваток крові в реакції нейтралізації. Проведено молекулярно-генетичну оцінку 20 ізолятів ентеровірусів свиней, виділених на території України, які мали поліантигенні властивості. Згідно результатів секвенування та філогенетичного аналізу їх віднесено до виду PTV I. Розроблена нова схема імунізації кролів. Напрацьовані антигени референтних та епізоотичних штамів ентеровірусів свиней для імунізації кролів. Одержані сироватки крові кролів та визначені в них титри антитіл. Проведено виділення клонів референтних штамів та ізолятів ентеровірусів свиней методом бляшок, вивчені їх властивості. Крім того, поновлено референтні штами ентеровірусів свиней Національної колекції лабораторії імуногенетики ентеровірусів свиней, визначена їх цитопатична та інфекційна активність у культурі клітин СНЕВ. Проведена реімунізація коня антигеном виробничого штаму вірусу хвороби Тешена свиней "Березнянський - 652". Одержана високоімунна сироватка для наборів діагностикумів ензоотичного енцефаломієліту (хвороби Тешена) свиней методами нейтралізації та імунофлуоресценції. Постійно підтримується перещеплювана культура клітин СНЕВ. Співробітники лабораторії приймали участь у науково-практичній конференції молодих вчених "Актуальні проблеми ветеринарної біотехнології та інфекційної патології тварин" (м. Київ, червень 2015 р). Отримано Патент України № 101245 на корисну модель "Спосіб культивування ентеровірусів свиней у культурі клітин Нер-2", опубліковано 25.08.2015 р. у Бюл. №16. Затверджені Державною ветеринарною та фітосанітарною службою України (протокол № 1 від 19.12.2013 р.) "Методичні рекомендації по клонуванню ентеровірусів свиней у культурі клітин за допомогою методу бляшкоутворення". Розроблені та затверджені Методичною комісією (протокол № 2 від 21.09.2015 р.) та Вченою радою ІВМ НААН (протокол № 10 від 22.09.2015 р.) Методичні рекомендації "Одержання специфічних імунних сироваток для діагностики ентеровірусних хвороб свиней". Опис продукції Набір для діагностики хвороби Тешена свиней шляхом реакції флуоресценції Автори роботи Божок В. І. Демиденко І. Ф. Музикіна Л. М. Романенко В. П. Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити