Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0216U005642, 0114U004585 , Науково-дослідна робота Назва роботи Метилування фактора елонгації трансляції 1А в злоякісних пухлинах та його функціональні наслідки Назва етапу роботи Керівник роботи Негруцький Борис Сергійович, Дата реєстрації 08-02-2016 Організація виконавець Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Опис етапу Об'єкт дослідження: Евкаріотичний фактор елонгації 1А (еЕF1A1). Мета роботи: Дослідити ступінь метилування еЕF1A1 при канцерогенезі. Створити точкові мутанти еЕF1A1, в яких лізинові залишки в 55, 79 та 165 положеннях заміщені на аргінинові. Розпочати ідентифікацію білків, на взаємодії із якими впливає метилування eEF1A1. Метод дослідження: Хроматографічне виділення білка; мас-спектрометрія; мутагенез, оснований на полімеразній ланцюговій реакції. Виділено еЕF1A з карциноми Льюіса і карциносаркоми Уокера та з печінки щурів. Визначено рівень метилування лізинових залишків eEF1A за допомогою мас-спектрометрії. Виявлена тенденція до зниження в пухлинах ступеня метилювання лізинових залишків eEF1A в 79, 165 та 318 положеннях, тоді як ступінь метилування лізину в 55 положенні не змінювалася. Результати вказують на залучення метилування еЕF1A до регуляції чи дерегуляції клітинних процесів при канцерогенезі та потребують подальшого вивчення його функціональної ролі. Отримані точкові мутанти eEF1A, в яких лізинові залишки 55, 79 та 165 замінені на аргінінові, які необхідні для подальших досліджень функціонального значення метилування. Ідентифіковані білки, на взаємодію з якими впливає метилування eEF1A в 55 положенні, а саме eEF1A1 (димер), інші фактори елонгації, рибосомні білки, шаперон HSP70, білки цитоскелету актин і тубулін, аміноацил-тРНК-синтази, РНК-гелікази, білки, задіяні в процесингу РНК та репарації і підтримання структури ДНК, проапоптичні білки та інші. За результатами досліджень опубліковано дві статті та представлено доповідь на ХІ Українському біохімічному конгресі. Опис продукції Отримана інформація про зниження рівня метилування лізинових залишків фактора елонгації трансляції 1А eEF1A в 79, 165 та 318 положеннях в клітинах злоякісних пухлин порівняно зі здоровими клітинами. 2. Отримані точкові мутанти eEF1A, в яких лізинові залишки 55, 79 та 165 замінені на аргінінові. Вони будуть застосовуватися у дослідженнях функціонального значення метилування eEF1A в здорових та пухлинних клітинах. 3. Оптимізована методика афінної очистки білків-партнерів eEF1A із клітин ссавців. 4. Ідентифіковані білки, на взаємодію з якими може впливати метилування лізину 55 eEF1A. Автори роботи Бондарчук Т.В. Власенко Д.О. Капустян Л.Л. Лисецький I.Л. Новосильна О.В. Порубльова Л.В. Шалак В.Ф. Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити