Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0216U007077, 0111U001206 , Науково-дослідна робота Назва роботи Дослідження про- та проти-онкогенної активності біологічних речовин клітинного походження Назва етапу роботи Керівник роботи Сидоренко Михайло Васильович, Дата реєстрації 25-03-2016 Організація виконавець Державна установа "Відділення біотехнічних проблем діагностики Інституту проблем кріобіології і кріомедицини НАН України Опис етапу Звіт про НДР: стор. 116, рис. - 28 , табл. - 8, фото - 36, джерел посилань – 97. За звітний період було досліджено вплив мезенхімальних стовбурових клітин людини (МСК КМл), Т-лімфоцитів, мезенхімальних стовбурових клітин кісткового мозку миші (МСК КМм) та інтерферону альфа-2b на розвиток пухлинної популяції клітин аденокарциноми молочної залози при моношаровому та сфероїдному рості. Об’єкт досліджень: мезенхімальні стовбурові клітини кісткового мозку людини (МСК КМл) та миші (МСК КМм) та пухлинні клітини лінії MCF-7. В роботі були задіяні імуноцитохімічні, цитофлуориметричні, молекулярно-біологічні методи, біохімічні та статистичні методи аналізу. Метою дослідження було охарактеризувати вплив біологічно активних речовин клітинниого походження на проліферацію, виживаність, рецепторний профіль та здатність до утворення багатоклітинних сфероїдів пухлинними клітинами in vitro та перебіг пухлинного процесу на тваринній моделі. Задачами дослідження було визначення кінетичних параметрів росту пухлинних клітин людини в культурі при інкубуванні з речовинами клітинного походження (інтерферон альфа-2b), оцінка рівня експресії деяких онкогенних маркерів пухлинними клітинами під впиливом МСКЛ КМл та Т-лімфоцитів, інтерферону альфа-2b. А також проведення порівняльного аналізу вищезазначених параметрів при різних строках культивування в моношаровій та сфероїдній культурі. Порівняння проводилося за рівнем експресії естрогенового рецептору, рецептору епідермального фактору росту, цитокератинів та Е-кадхеріну. Результати. К-середовище від Т-лімфоцитів загалом має про-онкогенний вплив на популяцію пухлинних клітин MCF-7. Оскільки стимулює проліферацію, знижує адгезію клітин, посилює експресію естрогенового рецептору та рецептору епідермального фактору росту та стимулює утворення багатоклітинних пухлинних сфероїдів у 5 разів більших, від контролю. К-середовище від МСК навпаки знижує проліферативну активність пухлинних клітин, знижує здатність клітин до міграції в суспензійну фракцію, знижує експресію естрогенового рецептору та рецептору епідермального фактору росту. А також к-середовище від МСК гальмує рост багатоклітинних пухлинних сфероїдів клітин лінії MCF-7 на 60% порівняно з контролем. Високі дози цитокіну ІФН-?-2b (104-105МО/мл) викликають зниження виживаності клітин лінії аденокарциноми молочної залози MCF-7. Рівень експресії ядерного естрогенового рецептору ER? пригнічується дією високих доз ІФН-?-2b (104- 105 МО/мл), таким чином збільшується відсоток клітин у культурі, які не експресують ER?. Одночасно експресія рецепторів E-cadherin клітинами підвищується на 38%, а експресія цитокератинів клону AE1-AE3 клітинами MCF-7 залишається на рівні контролю. МСК КМл також впливають на рецепторний статус пухлинних клітин. Так, при інкубування з МСК КМл відсоток Р-ЕФР+ клітин збільшується з 70,1% (контроль) до 88,3%, кількість Пан+ клітин зберігається на рівні 100%. За нашими результатами відсоток клітин, що експресують Е-кадхерін, після інкубування з МСК КМл знижується з 46% (контроль) до 13,8%, а експресія естрогенового рецептору пухлинними клітинами збільшуються з 35,3% у контролі до 42,8%, в той час як кількість ЕР- клітин суттєво не зменшується. Введення цитозолю клітин кісткового мозку мишей (цКМм) піддослідним тваринам сприяло гальмуванню росту перевивної пухлини на 17% - 31%. Підкол цитозолю клітин кісткового мозку мишей (цКМм) сприяло нормалізації деяких показників біохімії крові піддослідних тварин. Наукова та практична значимість Отримані дані мають як наукову так і практичну значимість. З наукової точки зору було досліджено фундаментальні механізми взаємодії пухлинної популяції та клітинного мікрооточення. При безконтактному спів культивуванні мессенджерами тут виступають гуморальні сигнали (інтерлейкіни, цитокіни, фактори росту), а посередниками – рецептори пухлинних клітин, які в свою чергу запускають каскад проліфераційних, адгезивних та міграційних процесів. З практичної точки зору визначення умов протипухлинної дії МСК КМл, Т-лімфоцитів та інтерферону альфа-2b особливо на рівні тваринної моделі дозволить розробити дієві протипухлинні засоби на базі цитозолів стовбурових клітин людини без ризику стимулювання пухлинної прогресії та клітинної контамінації. Опис продукції В результаті дослідження було визначено, кінетичні параметри росту пухлинних клітин людини в культурі при інкубуванні з речовинами клітинного походження (інтерферон альфа-2b), оцінка рівня експресії деяких онкогенних маркерів пухлинними клітинами під впиливом МСКЛ КМл та Т-лімфоцитів, інтерферону альфа-2b. Автори роботи Гергелюк Тетяна Сергіївна Городна Олександра Володимирівна Дем'яненко Д.П. Железна Мілана Володимирівна Перепелиціна Олена Михайлівна Сидоренко Михайло Васильвич Якимчук Олена Михайлівна Ястребова Олена Вікторівна Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити