Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0216U007301, 0110U006269 , Науково-дослідна робота Назва роботи Іонні канали та кальцієвий гомеостаз як мішені модуляторного впливу ендогенних та екзогенних біологічно активних речовин Назва етапу роботи Керівник роботи Шуба Ярослав Михайлович, Доктор біологічних наук Дата реєстрації 04-07-2016 Організація виконавець Міжнародний Центр молекулярної фізіології Національної Академії Наук України Опис етапу Нікель розглядається як селективний блокатор низькопорогових кальцієвих каналів Т-типу. Нещодавно в найбільш чутливій до Ni2+ Cav3.2 ізоформі T-каналу була виявлена Ni2+-зв'язуюча ділянка з критичним гістидином-191 (H191) в позаклітинній IS3-IS4 петлі каналу. Постулюється також, що всі кальцієві канали мають в своєму складі внутрішньопоровий сайт зв'язування, який обмежує максимальний струм проникаючих двовалентних катіонів (ПДК) і зумовлює їх блокування не проникаючими. Тим не менш, внесок двох сайтів в загальний ефект Ni2+ і його залежність від ПДК залишаються невизначеними. В даній роботі ми порівняли дію Ni2+ на дикотиповий, Ni2+-нечутливий Cav3.1w/t канал з його Cav3.1Q172H мутантом, в якому нативний глутамін (Q) в 172-й позиції, що еквівалентна критичному H191 в Cav3.2, був замінений на гістидин. Кожен з каналів був експресований в ооцитах Xenopus і була визначена блокада Ca2+, Sr2+ і Ba2+ струмів через них нікелем методами електрофізіології. Блокування Cav3.1w/t нікелем відповідало наявності двох сайтів зв'язування. Зв'язування Ni2+ з високоафінним сайтом (IC50=0.03-3 мкм в залежності від ПДК) приводило до максимального пригнічення струму на 20-30%, що залежало від величини мембранного потенціалу. Більша ж частина пригнічення (70-80%) була зумовлена зв'язуванням Ni2+ з низькоафінним сайтом (IC50=240-700 мкм). Q172H мутація в основному підвищувала спорідненість низькоаффінного блокування (до IC50=120-160 мкм). ІС50 зв'язування Ni2+ з обома сайтами як в Cav3.1w/t, так і Cav3.1Q172H по-різному модулювалася ПДК, вказуючи на різну ступінь конкуренції Са2+, Sr2+ і Ba2+ з Ni2+. Ми прийшли до висновку, що диференціальна чутливість до нікелю підтипів Т-каналів визначається лише H-вмісним зовнішнім сайтом зв'язування, який за відсутності Ni2+, може бути зайнятий ПДК, що в свою чергу впливає на проникність каналу. Опис продукції Виявлена здатність EMAP II індукувати апоптоз в клітинах LNCaP, що ростуть в практично позбавленому андрогенних гормонів живильному середовищі. Вірогідно що цей білок зможе бути використаний для лікування андрогенчутливих,та резистентних до гормональної терапії форм раку простати. Автори роботи Любанова О.П. Носаль О.В. Шуба Я.М. Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити