Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0217U000130, 0113U007730 , Науково-дослідна робота Назва роботи Дослідити ефективність методів направленого диференціювання фетальних нейрональних стовбурових клітин по серотонінергічному типу та визначити їх функціональну активність Назва етапу роботи Керівник роботи Цимбалюк Віталій Іванович, Дата реєстрації 19-01-2017 Організація виконавець ДУ "Інститут нейрохірургії ім.акад.А.П.Ромоданова НАМН України" Опис етапу На сьогоднішній день молекулярні механізми спеціалізації серотонінергічних нейронів зі стовбурових та прогеніторних нервових клітин вивчені далеко не повністю. Метою дослідження було визначення найбільш ефективних нейроіндукторів, здатних підтримувати життєздатність і функціональну активність серотонінергічних нейронів та їх детермінованих попередників, а також тестування регенеративної активності серотонінергічної популяції клітин, отриманих з їх допомогою, на молекулярному та клітинному рівні. Робота була проведена на суспензійній та органотиповій культурі зони n. raphe з використанням гістохімічних, ІФА та ПЛР методів. Встановлено, що BDNF та NGF стимулюють збільшення чисельності серотонінергічних нейронів в суспензійній культурі в 1,6 та 2 рази відповідно у порівнянні з контрольними зразками. Додавання в культуральне середовище BDNF та ретиноєвої кислоти призводить до збільшення вмісту серотоніну в культуральному матеріалі. Експресія гену Nkx2.2, який є маркером мітотично-активних попередників серотонінергічних нейронів, підтримується у присутності BDNF і збільшується під впливом EGF та FGFb. Експресія гену Pet1, що свідчить про наявність детермінованих прогеніторів серотоніногенезу, підтримується усіма досліджуваними факторами за виключенням екзогенного серотоніну. Експресія гену Tph1, маркера початку синтеза серотоніну, спостерігається під впливом FGFb, EGF та NGF. Отримані дані свідчать про те, що сумісне культивування органотипових зрізів зони n. raphe, з нанесеною механічною травмою, та суспензії прогеніторів серотоніногенезу, нарощених в умовах in vitro, запобігає ретроградній дегенерації, запускає процеси морфологічної регенерації, сприяє підвищенню рівню серотоніну. Більше того, відбувається стимуляція експресії регуляторних генів серотоніногенезу. Таким чином, наші дані продемонстрували, що перераховані нейроіндуктори впливають на різні фази серотоніногенезу і можуть бути використані для його регуляції. Серотонінергічна популяція клітин, отримана з їх допомогою, здатна ефективно стимулювати регенерацію зони n. raphe після травми. Опис продукції Спосіб дослідження біохімічних та молекулярно-генетичних наслідків нейротравми та процесів нейрорегенерації серотонінергічної системи на моделі ex vivo в тканинній культурі n. raphe, що є лабораторним методом дослідження і який відрізняється тим, що сагітальні зрізи зони ядер шва новонародженого щура культивуються в стандартних умовах піддають механічному травмуванню шляхом перетину нейрітно-гліальних волокон у різних напрямках, промивають фізіологічним розчином, культивують 2 тижня, по закінченні терміну культивування зразки фіксують та консервують для подальшого дослідження методами гістохімії, ПЛР (полімеразної ланцюгової реакції) та ІФА (імуноферментного аналізу). Автори роботи Бараненко Б.О. Васильєва І.Г. Галанта О.С. Дмитренко А.Б. Макарова Т.А. Олексенко Н.П. Цюбко.О.І. Чопик Н.Г. Шуба І.М. Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити