Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0217U000477, 0116U000177 , Науково-дослідна робота Назва роботи Одержати нові біоспецифічні сорбенти на основі кремній-неорганічних матриць та дослідити їх основні властивості та ефективність застосування у технологіях фракціонування плазми крові Назва етапу роботи Керівник роботи Даниш Тарас Васильович, Дата реєстрації 06-02-2017 Організація виконавець Державна установа "Інститут патології крові та трансфузійної медицини Національної академії медичних наук України" Опис етапу Звiт про НДР: 102 с., 1 табл., 11 рис., 3 додатки, 68 джерел літератури. Об'єкти дослідження: фракції плазми крові ІІ+ІІІ та ІІІ за Коном, фактори протромбінового комплексу, фактор VIII зсідання крові, плазміноген, альбумін, імуноглобулін G, Діасорб амінопропіловий та Діасорб-Діол (розмір пор 250-1500 A), гідрофобні ліганди, гідрофобні кремнеземні сорбенти. Мета роботи: синтезувати нові сорбенти на основі макропористих кремній-неорганічних матриць та гідрофобних лігандів, придатні для застосування в процесі технологічного одержання білкових препаратів плазми крові з використанням методів попереднього фракціонування, афінної хроматографії та антивірусної обробки. Методи: хімічні методи синтезу, хроматографічні методи виділення та очищення протеїназ, методи фракціонування плазми крові (спиртове, сольове, ПЕГ-переосадження), центрифугування, афінна та іоно-обмінна хроматографії, гель-фільтрація, діаліз, спектрофотометрія, методи визначення активності протеїназ (з хромогенними субстратами, коагулологічні з природніми субстратами), імуноферментні, електрофоретичні методи дослідження. В результаті виконання роботи одержані наступні науково-практичні результати: синтезовано гідрофобні похідні аміно- та гідроксипропіл-Діасорбів з розмірами пор 250, 500, 750, 1000 та 1500 A та лігандами ізопропіл, бутил, октил, феніл; досліджено фізико-хімічні властивості одержаних сорбентів, що характерні для макропористих кремнеземних матриць (жорсткість, висока хімічна та фізична стабільність, легкість регенерації, стійкість до дії мікроорганізмів, можливість стерилізації автоклавуванням); в експерименті вивчено сорбційно-десорбційні властивості сорбентів стосовно факторів зсідання крові та фібринолізу; сорбційна здатність щодо досліджуваних білків зростала в ряду ізопропіл-бутил-октил-феніл незалежно від способу хімічної прив'язки ліганда; обгрунтовано використання можливих місць застосування етапів гідрофобної хроматографії у технології фракціонування плазми крові - після висолювання високими концентраціями солями амонію, для видалення вірусінактивуючих хімічних реагентів, перед заключними етапами афінної хроматографії; на підставі одержаних результатів досліджень запропоновано здійснити експериментальне вивчення властивостей кремнеземних сорбентів з лігандами-активними тріазиновими барвниками за умов підвищеної гідрофобності розчину з метою виявлення ефективних методів фракціонування білкових факторів; зареєстровано технологію "Спосіб виділення фактора VIII зсідання крові " (0616U000066 від 27.01.2016 р.); одержано патент України на корисну модель № 107509 "Спосіб виділення фактора VIII згортання крові" (Бюл. 11, 10.06.2016 р.). Ступінь впровадження: акти впроваджень, доповіді на міжнародних наукових форумах, публікації в науковій літературі. Зареєстровано реєстраційну карту технології. Галузь застосування: центри крові, хіміко-фармацевтичні підприємства, науково-дослідні організації. Ефективність: впровадження результатів запланованих досліджень дозволять вдосконалити створені нами раніше технології одержання діагностичних та лікувальних білкових препаратів з утильних субфракцій переробки донорської плазми крові з використанням попереднього ПЕГ- та сольового фракціонування, біоспецифічної хроматографії на макропористих кремнеземних сорбентах, сольвент-детергентного та тіоціанатного методів інактивації вірусів шляхом введення етапу (етапів) гідрофобної хроматографії. Це дозволить підвищити ефективність процесів, скоротити затрати часу на здійснення технологій, мінімізувати втрати активності досліджуваних ферментів у процесі їх виділення та очищення. Опубліковано 16 наукових праць, в тому числі 3 статті, 12 тез, в тому числі 2 за кордоном, одержано 1 патент на корисну модель, зареєстровано 1 технологію одержання препарату. ФРАКЦІЇ ПЛАЗМИ КРОВІ ЗА КОНОМ, ГІДРОФОБНІ КРЕМНІЙ-НЕОРГАНІЧНІ СОРБЕНТИ, ФАКТОРИ ЗСІДАННЯ ТА ФІБРИНОЛІЗУ Опис продукції Суть запропонованого нами нововведення передбачає: поетапне осадження білків протромбінового комплексу (ППСБ) цитратом барію та їх сорбцію на гідроксиді алюмінію (ІІІ), відділення фібриногену, фібронектину та домішкових білків на ПЕГ-4000, іонообмінної (на DEAE-Sepharose) та негативної афінної (з сорбентом Діасорб-амінопропіловий-Procion blue HB) хроматографій та проведенням подвійної вірусної інактивації. Використання сольвент-детергентного методу вірусної інактивації відоме давно. Пропонується використання тіоціанату амонію для проведення хімічної вірусної інактивації з метою отримання вірус-безпечного препарату. Нововведення передбачає застосування вітчизняних макропористих кремнеземних носіїв та дешевих лігандів для біоспецифічного виділення в очищеному вигляді низки терапевтичних та діагностичних препаратів. Поєднання двох хімічних методів вірус-інактивації в одній технологічній схемі покращує вірусну безпеку кінцевих продуктів. Автори роботи Вороняк М.І. Даниш О.Й. Даниш Т.В. Деркач С.В. Дульцева Н.А. Мадич С.Є. Орлова Л.В. Рокошевська М.С. Шурко Н.О. Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити