Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0217U000855, 0113U000141 , Науково-дослідна робота Назва роботи Дослідження молекулярних механізмів відповіді злоякісних клітин на дію ензимотерапії на основі голодування за аргініном Назва етапу роботи Керівник роботи Стасик Олег Володимирович, Кандидат біологічних наук Дата реєстрації 10-03-2017 Організація виконавець Iнститут біології клітини НАН України Опис етапу Результати клінічних випробувань протипухлинної ензимотерапії на основі рекомбінантних аргінін-деградуючих ферментів вказують на необхідність її подальшого вдосконалення, зокрема розробки більш ефективних комбінаційних підходів. Необхідною але не достатньою умовою чутливості пухлинних клітин до даної терапії in vivo є пошкодження утилізації анаболічного прекурсора аргініну цитруліну, що опосередковується ферментом аргініносукцинатсинтитазою (ASS). Однак у наших попередніх дослідженнях було встановлено, що статус ферментів анаболізму аргініну, зокрема ASS, не визначає чутливість пухлинних клітин до терапії in vitro. З літературних даних також відомо, що зниження рівня експресії ASS у деяких випадках імовірно корелює з підвищенням метастатичного потенціалу пухлинних клітин. У відділі проводились дослідження з метою з'ясування впливу статусу ASS на фізіологію культивованих клітин гліоми людини, зокрема їх метастатичний потенціал. Встановлено, що рівень експресії білка ASS в клітинах усіх досліджуваних ліній гліом та нейробластом людини не завжди корелює із здатністю клітин до проліферації на середовищі з цитруліном. Було виділено клони клітин гліоми людини лінії U251 із стабільним виключенням експресії гену ASS за допомогою методу shRNA. Сконструйовано вектор для експресії ASS в клітинах ссавців та отримано стабільно-трансфіковавану лінію клітин U251 з надекспресією даного ферменту. Вперше показано, що сайленсинг гену ASS підвищує клоногенний потенціал та гомотипову адгезію клітин клітинах гліоми людини U251 in vitro. Встановлено, що відсутність експресії ASS практично не впливає на міграційні властивості клітин U251, проте, підвищує їх інвазивність. Також отримано продуцент рекомбінантного білка ASS людини на основі Esherichia coli та розроблено схему очистки білка з метою його подальшого використання для пошуку ефективних інгібіторів ASS, придатних для застосування in vivo. Опис продукції Встановлено, що рівень експресії білка ASS в клітинах усіх досліджуваних ліній гліом та нейробластом людини не завжди корелює із здатністю клітин до проліферації на середовищі з цитруліном. Було виділено клони клітин гліоми людини лінії U251 із стабільним виключенням експресії гену ASS за допомогою методу shRNA. Сконструйовано вектор для експресії ASS в клітинах ссавців та отримано стабільно-трансфіковавану лінію клітин U251 з надекспресією даного ферменту. Вперше показано, що сайленсинг гену ASS підвищує клоногенний потенціал та гомотипову адгезію клітин клітинах гліоми людини U251 in vitro. Встановлено, що відсутність експресії ASS практично не впливає на міграційні властивості клітин U251, проте, підвищує їх інвазивність. Також отримано продуцент рекомбінантного білка ASS людини на основі Esherichia coli та розроблено схему очистки білка з метою його подальшого використання для пошуку ефективних інгібіторів ASS, придатних для застосування in vivo. Автори роботи Ігуменцева Н.І. Барська М.Л. Бобак Я.П. Винницька Б.О. Вовк О.І. Воробець З.Д. Данилейченко В.В. Денега І.О. Кавалець Б.Б. Карацай О.В. Курліщук Ю.В. Линів Л.С. Переверзєва Г.Г. Ржепецький Ю.А. Сенчук О.Ю. Сибірна Н.О. Стасик О.Г. Чень О.І. Чернишук С.В. Шуваєва Г.Ю. Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити