Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0217U001235, 0116U000937 , Науково-дослідна робота Назва роботи Розробка нових методів флуоресцентної діагностики амілоїдних патологій Назва етапу роботи Керівник роботи Трусова Валерія Михайлівна, Доктор фізико-математичних наук Дата реєстрації 31-01-2017 Організація виконавець Харківський національний університет імені В.Н. Каразіна Опис етапу Згідно з технічним завданням метою першого етапу проекту була розробка нових флуоресцентних маркерів для детектування та структурної характеризації амілоїдних фібрил на основі масштабного скрінінгу новосинтезованих барвників. Окрім цього, робота була спрямована на удосконалення кількісних методів експрес-діагностики амілоїдних хвороб за допомогою нових та класичних флуоресцентних зондів, ідентифікацію маркерів, специфічних до амілоїдних фібрил різної морфології. Об'єкт досліджень - фізичні процеси і механізми формування флуоресцентного відгуку нових зондів у присутності амілоїдних фібрил та дії модуляторів фібрилогенезу, що залежать від різних фізичних чинників. Методи досліджень - методи абсорбційної та флуоресцентної спектроскопії, комп'ютерне моделювання. У роботі протестовано широке коло нових барвників різних класів, зокрема бензантронові, сквараїнові та ціанінові сполуки, щодо можливості їх використання як флуоресцентних маркерів при діагностиці амілоїдних хвороб. 14 барвників показали кращу чутливість до фібрил лізоциму та інсуліну, ніж тіофлавін Т. Дослідження впливу фізико-хімічних параметрів оточення на спектральні властивості потенційних маркерів на амілоїд дозволило виявити оптимальні умови детектування агрегатів. За допомогою індуктивно-резонансного переносу енергії у системі класичних амілоїдних маркерів "тіофлавін Т+конго червоний" було розроблено принципово новий метод детектування амілоїдів. Перевага методу - у тому, що він дозволяє запобігти псевдо-позитивному сигналу від тіофлавіну Т, що має високу чутливість до ліпідів та бактерій. Знайдено, що руйнування Н-агрегатів ціанінових зондів та поява у спектрах поглинання піку мономерів є індикаторами наявності у розчині фібрил лізоциму. Цей метод можна використовувати in vivo, оскільки спектри поглинання зондів не перекриваються зі спектрами біологічних молекул. Опис продукції Удосконалено метод скрінінгу флуоресцентних зондів як потенційних амілоїдних маркерів. Знайдено найбільш перспективні флуоресцентні зонди , зокрема сквараїни G6, G7 та бензантрони ІАН, АВМ, АМ4, ІВН, АМ12, А4, та інш. Розроблено три нових методів кількісного детектування та характеристики фібрил: 1) комплексний аналіз набору спектральних параметрів нових флуорофорів; 2) вимірювання спектрів поглинання гептаметинових ціанінових зондів, що показують зміну агрегаційного стану барвників під час зв'язування з білком; 3) використання індуктивно-резонансного переносу енергії у системі "тіофлавін Т + конго червоний". Автори роботи В. Трусова К. Вус Н. Камнєва О. Рижова У. Тарабара Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити