Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0218U001106, 0116U008724 , Науково-дослідна робота Назва роботи Розроблення імуноферментної тест-системи для одночасного визначення антигена р24 і специфічних антитіл до ВІЛ1/2 підвищеної чутливості Назва етапу роботи Керівник роботи Ганова Лариса Олександрівна, Дата реєстрації 19-01-2018 Організація виконавець Приватне акціонерне товариство "Науково-виробнича компанія "Діапроф-Мед" Опис етапу Звіт про НДР: 78 стр., 5 рис., 39 табл., дод. 2, джерел 2. Об'єкт дослідження - імуноферментна тест-система для визначення су-марних антитіл до ВІЛ-1/ВІЛ-2 та антигенів р24/р26 ВІЛ-1/ВІЛ-2 з підвище-ною чутливістю. Мета роботи - створення нової високочутливої діагностичної імуно-ферментної тест-системи для одночасного визначення антигенів р24/р26 ВІЛ-1/ВІЛ-2 та антитіл IgG, IgM, IgA до ВІЛ-1/ВІЛ-2 в сироватках або плазмі крові людини, що за показниками чутливості та специфічності не буде посту-патися іноземним CE-маркованим комерційним аналогам й використання якої дозволить виявляти ВІЛ на різних стадіях інфекційного процесу і дозволить підвищити безпеку донорської крові та знизити темпи розповсюдження ВІЛ-інфекції. Методи дослідження - імуноферментний аналіз, хроматографія білків, мікробіологічні, біохімічні, методи біокон'югації. За звітний етап були виконані роботи по виготовленню дослідної серії 006-17 тест-системи (124 наборів). Всі компоненти даного діагностикума виго-товлялись згідно розроблених на першому етапі виконання проекту техноло-гічних регламентів і специфікацій, які на другому етапі робіт були адаптовані до умов промислового виробництва. Проведено випробування якісних характеристик (чутливості та специ-фічності) дослідної серії тест-системи з використанням стандартних панелей сироваток і стандартних контрольних зразків. Діагностична здатність тест-системи визначати антитіла до ВІЛ-1 і ВІЛ-2 при дослідженні зразків стан-дартних панелей сироваток становила 100%. Тест-система виявляє Міжнарод-ний стандарт антигену р24 ВІЛ-1 в концентрації 1 МО/мл, стандарт р24 ВІЛ-1 (ABI) - 2,5 пг/мл, стандарт р24 ВІЛ-1 (МБА) - 20 пг/мл. Отримані результати показали спроможність тест-системи виявляти ВІЛ-інфекцію на всіх стадіях її розвитку з високою чутливістю, що не посту-пається її закордонним аналогам, які мають СЕ-маркування. При дослідженні в тест-системі ВІЛ-позитивних сироваток з низкою реактивністю без добавок і після внесення одного або декількох інтерферентних чинників встановлена ви-сока надійність тест-системи, яка коректно визначає маркери ВІЛ-інфекції. Параметр специфічності тест-системи при дослідженні стандартних па-нелей негативних сироваток становив 100%. При дослідженні в тест-системі сироваток з антитілами до ВІЛ-1 і ВІЛ-2 в різних концентраціях встановлено, що варіабельності результатів аналізу дуже невелика. Тотожність становить 8,5%, відтворюваність між серіями - 9,4%, між днями - 7% і між лабораторіями - 9%. Розроблена тест-система зберігає діагностичну та аналітичну чутливість у процесі зберігання при 4оС протягом 9 місяців (термін спостереження). Про-гнозований термін стабільності діагностикумів, розрахований по прискореному його зберіганню при підвищеній температурі, при зниженні активності на 10% становить 2,1 року. Тест-система зберігає здатність виявляти антитіла до ВІЛ 1/2 і коровий антиген ВІЛ в умовах зберігання при 30оС протягом 10 днів. При підвищенні температури до 37оС через 4 -10 днів її здатність визначати коровий антиген ВІЛ знижується до 10 пг/мл, при цьому залишкова активність щодо специфіч-них антитіл висока і становить 98%. Після первинного розпакування тест-системи і подальшого її використан-ня 15 разів в різні дні її якісні характеристики не змінюються. Здатність діагно-стикума виявляти ВІЛ зберігається при багаторазовому заморожуван-ні/відтаюванні (після четвертої процедури активність знижується тільки на 13%). Розроблена тест-система адаптована до проведення реакції на стандарт-ному обладнанні для ІФА, на термошейкері та імуноферментному аналізаторі відкритого типу. Тривалість процедури ІФА становить на стандартному облад-нанні 2 години, на термошейкері та імуноферментному аналізаторі - 1,5 годи-ни. Ключові слова: імуноферментний аналіз, чутливість, специфічність, точність результатів, стабільність при зберіганні. Опис продукції Випробування якісних характеристик (чутливості та специфічності) дослідної серії тест-системи з використанням стандартних панелей сироваток і стандартних контрольних зразків. Діагностична здатність тест-системи визначати антитіла до ВІЛ-1 і ВІЛ-2 при дослідженні зразків стан-дартних панелей сироваток становила 100%. Тест-система виявляє Міжнародний стандарт антигену р24 ВІЛ-1 в концентрації 1 МО/мл, стандарт р24 ВІЛ-1 (ABI) - 2,5 пг/мл, стандарт р24 ВІЛ-1 (МБА) - 20 пг/мл. Автори роботи В.Д.Думанський Л.М.Мойса Л.О.Ганова Н.О.Дмітрієва О.А.Петрик О.К.Кисельова О.М.Чумак Т.Ю.Трохимчук Ю.І.Горлов Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити