Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0218U005169, 0113U003100 , Науково-дослідна робота Назва роботи Вивчення молекулярно-генетичних особливостей генетично модифікованих культурних рослин та встановлення закономірностей функціонування трансгенів Назва етапу роботи Керівник роботи Моргун Богдан Володимирович, Дата реєстрації 04-06-2018 Організація виконавець Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України Опис етапу Проведено роботу з генетичної трансформації пшениці та кукурудзи in vitro та in planta. Для відпрацювання Agrobacterium-опосередкованої трансформації пшениці in vitro розроблено модифіковане середовище (МС з додаванням 0,5 мг/л БАП та 0,16 мг/л піклораму) для регенерації (до 60%); в якості експлантів використано калюс, отриманий з незрілих зародків та апікальних меристем тридобових асептичних проростків (18-добовий); встановлено концентрації антибіотиків тиментину (350 мг/л) та цефтріаксону (400 мг/л), необхідні для елімінації агробактерій, підсилення регенерації, стимуляції росту рослин-регенерантів пшениці, приросту їх біомаси та вкорінення; вивчено гістологічні особливості регенерації пшениці в присутності антибіотика цефтріаксона у культуральному середовищі (регенерація відбувається шляхом прямого органогенезу); в залежності від конструкції в якості селективних агентів використано паромоміцин (100 мг/л) або фосфінотрицин (5 мг/л). Вперше отримано трансгенні рослини пшениці сортів Подолянка та Зимоярка, стійкі до гербіциду фосфінотрицину (Баста®), які експресують ген bar. Частота трансформації становила 1,8% для сорту Подолянка та 1,6% для сорту Зимоярка. В результаті Agrobacterium-опосередкованої трансформації пшениці in planta отримано канаміцин-стійкі та фосфінотрицин-стійкі рослини пшениці. Здійснено Agrobacterium-опосередковану та біолістичну трансформацію калюсів кукурудзи різних генотипів та отримано стійкі до гербіциду фосфінотрицину (Баста®) рослини Т1. Створено вектори рСВ182 та рСВ241, які містять послідовність гена стійкості до лускокрилих комах cry1A(b) та здатні до його передачі в рослинний геном. Відпрацьовані всі необхідні етапи культивування in vitro апікальних меристем пагонів спельти для отримання регенерантів. На підставі успішно проведеної генетичної трансформації пшениці і кукурудзи з’ясовано молекулярно-генетичні особливості біотехнологічних рослин та вивчено закономірності функціонування трансгенів. Опис продукції Виділення апікальних меристем з 3-добових асептичних проростків пшениці, вирощування їх 18 діб на середовищі для отримання калюсних культур, обробку калюсу бактеріальною суспензією та ко-культивування з A. tumefaciens, отримання трансформантів на регенераційному середовищі, доповненому антибіотиком цефтріаксоном (400 мг/л) для елімінації A. tumefaciens, та відповідним селективним агентом (в залежності від генетичної конструкції). Автори роботи Банникова Марія Олександрівна Горбатюк (Волч) Ірина Романівна Нітовська Ірина Олександрівна Тараненко Артем Миколайович Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити