Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0219U000058, 0118U005080 , Науково-дослідна робота Назва роботи Молекулярні механізми пластичності пухлинних клітин, які контролюють процеси епітелійно-мезенхімного/мезенхімно-амебоїдного/мезенхімно-епітелійного переходів (EMT/MAT/MET): роль адаптерного протеїну Ruk/CIN85. Назва етапу роботи Керівник роботи Горак Ірина Романівна, Дата реєстрації 10-01-2019 Організація виконавець Інститут біохімії ім. О.В.Палладіна НАН України Опис етапу Проаналізовано експресію мРНК генів, залучених до епітелійно-мезенхімного переходу методом кількісної ПЛР у клітинах лінії 4Т1 з надекспресією та пригніченою експресією адаптерного протеїну Ruk/CIN85 у порівнянні з контрольними сублініями. Встановлено, що надекспресія Ruk/CIN85 у клітинах 4Т1 супроводжується достовірним зростанням експресії мРНК генів Zeb1, Zeb2, Snai1, Twist1, Vim, Il1a, Il6, Cxcl5, Plau, Serpine1, Lox та достовірним пригніченням експресії мРНК генів Klf17, Myb, Cdh1, Tjp1, Icam1, Itgb1, Cfl1, Сcl2, Tnf, Mmp2, Mmp9, Ctsd, Plaur у порівнянні з контролем. Пригнічення Ruk/CIN85 веде до достовірного зростання експресії Klf17, Myb, Icam1, Itgb1, Cfl1, Сcl2, Tnf, Mmp2, Mmp9, Ctsd, Plaur та достовірного зниження експресії Zeb1, Zeb2, Snai1, Twist1, Vim, Il1a, Il6, Cxcl5, Mmp14, Plau, Serpine1, Lox, Loxl2 порівняно з контрольною сублінією. Аналіз активності ензимів, що беруть участь у ремоделюванні позаклітинного матриксу продемонстрував, що активність матриксних металопротеїназ ММР-2 та ММР-9, та поліамінооксидази достовірно знижується, а диамінооксидази та чутливої до семікарбазиду амінооксидази - зростає у кондиційованому середовищі, яке продукується клітинами лінії 4Т1 з надекспресією Ruk/CIN85. При пригніченні експресії Ruk/CIN85, навпаки, продемонстровано зростання активності ММР-2, ММР-9 і поліамінооксидази. Методом кількісної ПЛР оцінено рівні експресії генів, залучених до репрограмування (Klf4, Pou5f1/Oct4, Sox2, Myc, Nanog) та поверхневих маркерів ракових стовбурових клітин (Cd24 i Cd44) у клітинах лінії 4Т1 з різним вмістом Ruk/CIN85. Встановлено, що при надекспресії Ruk/CIN85 у клітинах лінії 4Т1 достовірно зростає експресія Klf4, Nanog і Cd44 і знижується експресія Cd24, а пригнічення експресії Ruk/CIN85 веде до достовірного зниження рівня експресії Pou5f1/Oct4, Cd44 і підвищення Cd24. Також, надекспресія Ruk/CIN85 супроводжувалась зростанням здатності клітин 4Т1 до формування сфероїдів (мамосфер), а пригнічення експресії Ruk/CIN85 вело до втрати здатності до сфероїдоутворення, що свідчить про потенційну роль Ruk/CIN85 у контролі прояву ознак ракових стовбурових клітин. Отримані результати свідчать про те, що клітини 4Т1 з надекспресією Ruk/CIN85 характеризуються набуттям епітелійно-мезенхімної/мезенхімно-амебоїдної пластичності, тоді як пригнічення Ruk/CIN85 веде до підтримання епітелійного фенотипу клітин 4Т1. Опис продукції Молекулярні механізми пластичності пухлинних клітин, які контролюють процеси епітелійно-мезенхімного/мезенхімно-амебоїдного/мезенхімно-епітелійного переходів (EMT/MAT/MET): роль адаптерного протеїну Ruk/CIN85 у контролі експресії генів, залучених до регулювання рухливості, інвазивності та метастазування раку молочної залози на моделі клітин лінії 4Т1. Автори роботи Геращенко Денис Сергійович Скатерна Тетяна Дмитрівна Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити