Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0219U000538, 0113U002779 , Науково-дослідна робота Назва роботи Вивчення впливу олігонуклеотидів на сигнальні білки та експресію генів вродженого імунітету Назва етапу роботи Керівник роботи Ткачук Зеновій Юрійович, Дата реєстрації 06-02-2019 Організація виконавець Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Опис етапу Проведено мас-сректрометричний аналіз складу олігорибонуклеотидів (ОРН) дріжджової РНК, основна доля яких припадає на гетерогенні ОРН довжиною від 4 до 7 нуклеотидів. Підтверджено ефективність хроматографічного розділення ОРН за їх довжиною. MALDI-Tof-Tof мас-спектри ОРН свідчать, що піки на хроматограмі належать олігорибонуклеотидам різної довжини, а саме мінорній фракції від 2 до 4 нуклеотідів, домінуючій фракції від 4 до 7 нуклеотидів та незначній фракції від 10 до 15. Показано наявність комплексоутворення ОРН з спиртовим цукром манітолом на відміну від його аналогу сорбітолу та лактози. Використовуючи методи ІЧ- та Раманівської-Фур'є спектроскопії, а також математичну модель MCR-ALS визначено оптимальні співвідношення комплексоутворення у системі ОРН-ліганд у суміші РНК:манітол, яке становить 3:1, відповідно з комплексоутворенням близько 100%. Низкою спектральних методів було продемонстровано здатність олігорибонуклеотидів (ОРН) та їх похідних змінювати конформацію Інтерферону alpha-2b та його термальну стабільність. Аналіз спектрів КД за допомогою програмного забезпечення CDNN показав, що конформаційні зміни в білку під впливом препаратів ОРН відбуваються переважно в альфа- спіралі, що свідчить про наявність зміни у вторинній структурі білка. Отримані дані по зв'язуванню IFN з ОРН та комплексом ОРН-D:манітол свідчать на користь припущення про можливість зв'язування ОРН поза активним центром білків і їх здатність змінювати конформацію білків і їх структуру. Показано, що вірус грипу FM147 індукує надекспресію тол подібних рецепторів, Tlr3, Tlr7 та Tlr8, які запускають надмірну реакцію системи уродженого імунітету, що призводить до руйнування клітин легенів. Введення ОРН-D-M для профілактики та лікування інфекції грипу інгібує надекспресію Tlr3, Tlr7 та Tlr8. Отримані результати свідчать, що ОРН-D-M можуть бути ефективними антагоністами TLR-3, TLR-7 і TLR-8 інгібуваючи активність NF-kB і пригнічуючи продукуваня цитокінів, хемокінів та про-оксидантів під час інфекції грипу. Перешкоджання надекспресії генів вродженого імуннітету вказує на механізм дії комплексу ОРН-D-M. Комплекс OРН-D-M має захисний ефект у моделі ТАА-індукованого гострого токсичного ураження печінки. Основні механізми за допомогою яких цей комплекс захищає печінку від токсичного ураження, пов'язаний з протизапальними властивостями та здатністю модулювати NF-кB сигналінг. Оскільки NF-кB є центральним посередником транскрипції, який регулює експресію запальних цитокінів (TNF-alpha, IL-6), ми припускаємо, що пригнічуючи активацію NF-kB, вони призводить до зниження експресії мРНК TNF-alpha та IL-6. Опис продукції Показано, що олігоаденілат з кількістю в 5 нуклеотидів та з 2'-5' зв'язком, яка проявляє найвищу енергію взаємодії з інтерфероном, що узгоджується з результатами вивчення ентальпії та ентропії цієї взаємодії. Автори роботи Вівчарик Марина Михайлівна Левченко Світлана Миколаївна Марчишак Тетяна Вікторівна Мельнічук Наталія Сергіївна Ніколаєв Роман Олександрович Семернікова Лариса Іванівна Скоробогатов Олександр Ткачук Зеновій Юрійовичк. Ткачук Лариса Володимирівна Щодрий Володимир Богданович Яковенко Тетяна Григорівна Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити