Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0219U001693, 0115U004187 , Науково-дослідна робота Назва роботи Використання молекулярних та клітинних технологій для отримання біотехнологічних рослин пшениці та кукурудзи стійких до гербіциду гліфосату Назва етапу роботи Керівник роботи Моргун Богдан Володимирович, Дата реєстрації 18-02-2019 Організація виконавець Інститут клітинної біології та генетичної інженерії НАН України Опис етапу Проведено Agrobacterium-опосередковану трансформацію 18 денного калюсу, отриманого з апікальних меристем пшениці сортів Подолянка, Зимоярка та Ятрань 60 (595 шт. первинного калюсу пшениці сорту Зимоярка, 548 шт. - сорту Подолянка та 448 шт. - сорту Ятрань 60), генетичними векторами, Т-ДНК яких містить гени СР4 epsps (стійкість до гліфосату) та nptII (стійкість до канаміцину); в результаті отримано чотири трансформанта сорту Подолянка. Такими ж векторами здійснено Agrobacterium-опосередковану трансформацію 1791 калюсу, отриманого з незрілих зародків пшениці сорту Подолянка; загалом після селекції отримано 144 рослини-регенеранта, 45 з яких проаналізовано ПЛР-методом - у 17 рослин виявлено послідовність гену nptII. Підібрано вектор рСВ135 та регенераційно-активний генотип PLS61хДК267 для біолістичної трансформації калюсу кукурудзи. Встановлено, що використання калюсів кукурудзи гібридних генотипів для трансформації було більш ефективним порівняно з калюсами інбредних ліній. В результаті Agrobacterium-опосередкованої трансформації 1731 калюсу, отриманого з незрілих зародків кукурудзи, регенеровано 18 імовірних рослин-трансформантів. Проведено роботу по створенню вектора з геном гліфосат оксидази. Опис продукції Трансгенних лінії кукурудзи отримують шляхом біолістичної трансформації. Для отримання вихідного матеріалу проводять запилення донорних рослин, відбір та стерилізацію качанів кукурудзи з гібридними зародками F1, асептичне видалення та експлантацію незрілих зародків на живильне середовище для індукції калусогенезу. Після біолістичної трансформації відбирають калюси на селективному середовищі для калусогенезу, регенерують рослини на селективному середовищі для регенерації, висаджують відселектовані рослини-регенеранти у ємності з ґрунтовою сумішшю та вирощують в умовах штучного клімату. Відбір рослин проводять на селективному фоні. ДНК-аналізу піддають усі живі рослини-регенеранти після дії селективного фактора. Автори роботи Банникова Марія Олександрівна Жалій Наталія Андріївна Нітовська Ірина Олександрівна Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити