Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0219U001826, 0116U002208 , Науково-дослідна робота Назва роботи Створення нових біосенсорних та ензиматичних методів визначення вмісту креатиніну як біомаркера функціонального стану нирок та контролю процесу гемодіалізу Назва етапу роботи Керівник роботи Гончар Михайло Васильович, Кандидат педагогічних наук Дата реєстрації 06-03-2019 Організація виконавець Iнститут біології клітини НАН України Опис етапу Об'єкт дослідження: рекомбінантні ферменти біоаналітичного значення, біосенсорний аналіз, ензиматичний аналіз, креатинін, біологічні зразки. Мета роботи: оптимізація біосенсорного та ензиматичного методів аналізу креатиніну на реальних клінічних зразках біологічних рідин для оцінки функціонального стану нирок та ефективності гемодіалізу. Методи дослідження: біохімічні, хроматографічні, біоелектрохімічні та ензимологічні методи, підходи білкової хімії та аналітичної біотехнології. У результаті проведеної роботи: За використання КДІ та спектрофлуорометричного методу моніторингу продукту ензиматичної реакції (йонів амонію) проведено оптимізацію одночасного аналізу креатиніну та аміаку в сироватках крові людини. На основі КДІ та наночастинок Zn(Hg)S/Сu сконструйовано амперометричний біосенсор для кількісного визначення креатиніну. Створений біосенсор характеризується високою cелективністю та чутливістю до креатиніну (90,8 ± 2,8 А?М-1?м-2). Лінійний діапазон біосенсора спостерігається в діапазоні від 0,03 мM до 3,5 мM із нижньою межею визначення креатиніну 20 мкM. За використання альтернативної амоній-чутливої хемосенсорної мембрани - на основі електроосадженого поліаніліну (ПАНі) у комплексі із Нафіоном - сконструйовано інший біосенсор із вищою чутливістю до креатиніну (424 ± 20 А?М-1?м-2). Лінійний діапазон біосенсора спостерігається в межах від 0,015 мM до 0,9 мM із нижньою межею визначення креатиніну - 12 мкM. Розроблені біосенсори на основі рекомбінантної КДІ успішно апробовано для одночасного аналізу креатиніну та амонію в реальних зразках сироваток крові. Порівняльний аналіз результатів визначення креатиніну в зразках сироватки крові пацієнтів із порушеною функцією нирок до та після проведення процедури гемодіалізу розробленими біосенсорним на ензиматично-флуорометричним методами показав високий рівень кореляції аналітичних даних (R = 0,998), що свідчить про надійність і точність запропонованих підходів. Створено лабораторний прототип біоаналітичного набору для ензиматично-флуориметричного аналізу креатиніну та амонію в біологічних рідинах людини, оптимізовано склад компонентів набору та опрацьовано Інструкцію використання набору. Опис продукції Біоаналітичні методи на основі ферментів та генетично модифікованих клітин Автори роботи Іваш М. Ф. Гайда Г. З. Демків О.М. Закальська О.М. Закальський А.Є. Куцяба В.І. Прокопів Т.М. Серкіз Р.Я. Смуток О.В. Стасюк Н. Є. Стасюк Н.Є. Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити