Пошук академічних текстів

Інформація × Реєстраційний номер 0219U100671, 0113U004305 , Науково-дослідна робота Назва роботи Роль різних форм білка Bcr-Abl в сигнальних шляхах та формуванні пухлинного фенотипу при мієлопроліферативних неоплазмах Назва етапу роботи Керівник роботи Телегєєв Геннадій Дмитрович, Доктор біологічних наук Дата реєстрації 22-02-2019 Організація виконавець Інститут молекулярної біології і генетики Національної академії наук України Опис етапу Дослідження присвячено вивченню молекулярного патогенезу Ph-позитивних лейкемій, розробці діагностичних і моніторингових методів моніторингу мієлопроліферативних неоплазм, підходів до терапії. В роботі використано стандартні молекулярно-біологічні протоколи, що включали: виділення РНК і ДНК, добір олігонуклеотидних праймерів, зворотно-транскриптазна полімеразна ланцюгова реакція (ЗТ-ПЛР), ПЛР, real-time ПЛР, створення рекомбінантної ДНК, отримання рекомбінантних білків, трансформація бактерій, виділення й рестрикційний аналіз плазмідної ДНК, гібридизація за Саузерном, секвенування ДНК, порівняльний аналіз послідовностей, афінна хроматографія, трансформація клітин еукаріотів, Вестерн-блот аналіз, флуоресцентна мікроскопія, первинні культури клітин крові, мікроскопію надвисокої роздільної здатності STED. На основі даних мас-спектрометрії вивчалась взаємодія РН-домену Bcr з 23 білками. Отримані рекомбінантні вектори, що несуть послідовності ДНК цих цільових протеїнів для їхньої бактеріальної та еукаріотичної експресії. Підтверджено зв‘язування з білками: SMC1, β-тубулін, клатрин, Usp 1,GLG1, кортактин. Показано, що інгібітор USP1 (ML323) призводить до зміни клітинної локалізації USP1. Запропоновано МН-мультитест-система для виявлення мутацій у хворих з мієлоїдними новоутвореннями. За допомогою імунофлуорисцентного аналізу виявили колокалізацію білка GLG1 із онкобілком Bcr-Abl у клітинах К562. За результатами коімунопреципітації встановили взаємодію білка GLG1 і онкобілка Bcr-Abl у клітинах К562. Вперше показано, що вітамін Е направлено стимулює експресію ключових факторів мієлоїдного диференціювання - зокрема, нейтрофільний гранулопоез, в культурі мієлоїдних лейкемічних клітин К562. Опис продукції Клоновані ділянки гена bcr, що відповідають C-2- і PH-доменам білка Bcr, отримані рекомбінантні білки, що відповідають C-2 і РН- доменам. За допомогою імунофлуорисцентного аналізу виявили колокалізацію білка GLG1 із онкобілком Bcr-Abl у клітинах К562. За результатами коімунопреципітації встановили взаємодію білка GLG1 і онкобілка Bcr-Abl у клітинах К562. Вперше показано, що вітамін Е направлено стимулює експресію ключових факторів мієлоїдного диференціювання - зокрема, нейтрофільний гранулопоез, в культурі мієлоїдних лейкемічних клітин К562. На основі даних мас-спектрометрії вивчалась взаємодія РН-домену Bcr з 23 білками. Отримані рекомбінантні вектори, що несуть послідовності ДНК цих цільових протеїнів для їхньої бактеріальної та еукаріотичної експресії. Підтверджено зв‘язування з білками: SMC1, β-тубулін, клатрин, Usp 1,GLG1, кортактин. Показано, що інгібітор USP1 (ML323) призводить до зміни клітинної локалізації USP1. Запропоновано МН-мультитест-система для виявлення мутацій у хворих з мієлоїдними новоутвореннями. Автори роботи Додано в НРАТ 2020-04-02 Закрити